【摘 要】
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目的 在人肝癌组织中尾加压素Ⅱ(UⅡ)表达上调,肝脏干细胞即卵圆细胞发生增殖,本研究旨在体外探讨尾加压素Ⅱ(UⅡ)对卵圆细胞异常增殖的作用机制及其在肝细胞癌发生发展
【机 构】
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首都医科大学基础医学院病理生理学教研室
【出 处】
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2014年肿瘤多学科综合诊治新进展学术研讨会
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目的 在人肝癌组织中尾加压素Ⅱ(UⅡ)表达上调,肝脏干细胞即卵圆细胞发生增殖,本研究旨在体外探讨尾加压素Ⅱ(UⅡ)对卵圆细胞异常增殖的作用机制及其在肝细胞癌发生发展中的作用.方法 采用外源性UⅡ刺激卵圆细胞,通过MTT法及BrdU增殖检测试剂盒观察细胞增殖情况,Western blot检测NADPH氧化酶亚基p40-phox和p47-phox表达情况.应用DCFH-DA探针检测UⅡ刺激下卵圆细胞内ROS水平.给予NADPH氧化酶抑制剂apocynin预处理细胞后给予UⅡ孵育,通过MTT法检测细胞增殖变化,Western blot检测PKC、ERK1/2和p38MAPK的磷酸化水平.结果 体外实验可见UⅡ孵育细胞可明显引起促增殖效应,并引起NADPH氧化酶亚基p40-phox和p47-phox表达上调.UⅡ刺激后细胞内绿色荧光较对照组增强,代表细胞内ROS水平升高.加入UⅡ受体拮抗剂urantide预处理组细胞内ROS生成较UⅡ组降低.应用apocynin预处理细胞后,UⅡ介导的细胞增殖同样受到一定程度的抑制,同时PKC、ERK1/2和p38MAPK蛋白的磷酸化水平低于单纯UⅡ刺激组.结论 UⅡ可以通过激活NADPH氧化酶介导ROS产生参与促卵圆细胞增殖作用.此外,抑制ROS的产生可影响介导卵圆细胞增殖的PKC、ERK1/2及p38MAPK通路.UⅡ的促卵圆细胞增殖作用可能导致细胞异常分化,从而进一步导致肝癌的发生.
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