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长链烷烃降解产甲烷过程普遍存在于油藏、油污土等地下缺氧环境.国内外研究者通过实验室培养获得了长链烃降解产甲烷富集物,发现了数量众多的未培养微生物,但是迄今为止,人们对参与烷烃降解产甲烷过程的关键微生物类群了解甚少.本研究从胜利油田培养获得了中温正十六烷烃降解产甲烷富集物,分别添加12C和13C标记的正十六烷烃,培养218天后,13C-标记烃降解富集物中的甲烷13C丰度达到了54.1%.超高速密度梯度离心分离12C和13C标记的基因组DNA后,发现13C标记的DNA最高峰向重的CsTFA密度层中迁移,结合T-RFLP和16S r RNA基因克隆文库技术,我们发现有两类微生物被显著标记.