【摘 要】
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目的 探讨重离子对人体淋巴细胞端粒长度的影响,从而进一步了解端粒在辐射损伤以及修复中的作用.方法 将培养人淋巴细胞按照射剂量分为0.1,0.5,1.0和2.0 Gy实验组及O Gy对照组,使用14C重离子(中国科学院近代物理研究所)照射,剂量率为0.3～0.5 Gy·min-1,实验组按照后时间分为2,12,24,48和72 h组.提取各样品基因组DNA,采用荧光实时定量PCR检测端粒相对长度,样
【机 构】
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中国辐射防护研究院放射医学与环境医学研究所,山西太原030006
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目的 探讨重离子对人体淋巴细胞端粒长度的影响,从而进一步了解端粒在辐射损伤以及修复中的作用.方法 将培养人淋巴细胞按照射剂量分为0.1,0.5,1.0和2.0 Gy实验组及O Gy对照组,使用14C重离子(中国科学院近代物理研究所)照射,剂量率为0.3～0.5 Gy·min-1,实验组按照后时间分为2,12,24,48和72 h组.提取各样品基因组DNA,采用荧光实时定量PCR检测端粒相对长度,样品包含待测基因组DNA和对照单拷贝基因36B4(位于12号染色体).所有样本均进行两组扩增,一为端粒片段(T)扩增,一为参照基因(S)扩增.荧光实时定量PCR反应条件为：95℃10 min,95℃15 s,54℃120 s,30个循环.结果 培养人淋巴细胞经重离子照射后0.1 Gy组相对T/S比率介于1.06 ～ 1.24,0.5 Gy组相对T/S比率介于1.01 ～1.38,1 Gy组相对T/S比率介于1.24 ～1.66,以上各组较对照组0Gy组均有不同程度的增加,并且随时间延长相对T/S比率呈现上升趋势,到72 h达到最大值,2 Gy组相对T/S比率于2,12和24 h分别为0.95,0.98和0.97,较对照组未见明显增加,48 h相对T/S比率为1.13,到72 h达到1.33,同样出现上升趋势.比较24,48和72 h三个照射后时间组不同剂量的相对T/S比率结果显示,1 Gy剂量组的相对T/S比率在各时间组均出现峰值,分别为1.24,1.25和1.66较0.1,0.5以及2 Gy时增加.结论 重离子可以诱导淋巴细胞端粒延长,并具有一定的剂量依赖性和时间依赖性,其可能在辐射损伤修复中发挥重要作用.
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