钙离子介导的丁香假单胞菌细菌素作用机理研究

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丁香假单胞菌番茄致病变种(Pseudomonas syringae pv.tomato)DC3000菌株(DC3000)作为模式病原菌与拟南芥的互作体系已被广泛用于研究细菌与植物互作的机理。通过转座子突变和高通量细菌生长测定体系笔者筛选得到一株对植物提取物敏感并且丧失致病力的DC3000突变体菌株。进一步分析发现突变体中因转座子插入导致一个隐含的saxE基因发生转录缺陷,造成细菌在植物提取液中生长受抑制且丧失在寄主植物中的定殖能力。围绕这一发现,综合运用遗传学,植物化学以及分子生物学等多种手段,笔者首先发现钙离子是植物和提取物中抑制saxE缺陷型菌株(△saxE)生长的物质基础,同时发现细菌侵染过程中其所处环境中游离态钙离子的动态变化与病程相关。其次,通过筛选回复突变体鉴定得到DC3000中细菌素编码基因是钙离子抑制△saxE生长的必需基因。序列相似性分析表明该细菌素类似于大肠杆菌中的细菌素M(coliein M),进一步研究发现存在钙离子条件下,该细菌素可能依赖sec系统被分泌至周质,这一特征在colicin M及colicin M like细菌素中首次被发现,为这类细菌素的释放机制提供了思路。本研究揭示了钙离子参与的一种新的植物抑菌机制,同时也为未来农作物抗病性改良提供参考。
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