家蚕丝腺表达hGM-CSF的丝素重链基因打靶

来源 :中国蚕学会第六届青年学术研讨会 | 被引量 : 0次 | 上传用户:sitmaar
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为了通过基因打靶实现外源基因在丝腺组织特异表达,克隆并测定了丝素重链基因(fib-H)启动子及其旁侧序列、fib-H内含子和第二外显子部分序列,并分别作为基因打靶的同源臂,构建了带有A3启动子驱动GFP的表达盒、丝素轻链启动子驱动hGM-CSF的打靶载体;体外翻译和体内瞬时表达结果显示,该基因打靶载体可以在后部丝腺组织匀浆中表达hGM-CSF,在丝腺可以检测到GFP的表达;将该基因打靶载体用脂质体转染BmN细胞后可获得GFP荧光细胞;将混有脂质体的基因打靶载体通过精子介导法注入到处女蛾中得到转基因家蚕,并已传代到第四代,PCR及PCR产物测序表明GFP和hGM-CSF基因均稳定遗传。
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