橡胶树白粉菌效应蛋白预测及功能初步研究

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白粉病是橡胶树重要叶部病害之一,由专性寄生菌橡胶树白粉菌(Oidium heveae B.A.Steinmann)引起,其分子致病机理尚不明确。本实验根据实验室前期完成橡胶树白粉菌HO-73基因组及互作转录组数据,通过生物信息学分析,我们初步筛选到橡胶树白粉菌候选效应蛋白233个,具有以下3个特征:存在预测信号肽序列;无跨膜域结构(移除前20个氨基酸);除白粉菌外,在NCBI nr数据库中无其他同源序列(BLASTP,e<10-5)。多序列比对分析发现其中7个橡胶树白粉菌预测效应蛋白为白粉菌共保守效应蛋白。进化聚类分析证实橡胶树白粉菌候选效应蛋白之间变异较大。同时,通过保守结构域分析(SMART:http://smart.emblheidelberg.de/)发现部分效应蛋白含有公共保守模序,其中Y/F/WxC效应蛋白共106个,RxLR效应蛋白14个。由于橡胶树白粉菌目前无法进行遗传操作,因此,我们通过构建植物瞬时表达载体PVX::effectors,利用农杆菌介导的烟草瞬时表达技术,在模式植株烟草上瞬时表达橡胶树白粉菌预测效应蛋白,对橡胶树白粉菌效应蛋白的毒性或无毒性功能进行初步筛选研究。本实验完成了20个橡胶树白粉菌预测Y/F/WxC效应蛋白基因序列扩增及表达载体构建。为橡胶树白粉菌效应蛋白的毒性或无毒性功能的初步筛选及进一步功能验证奠定良好的基础。
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