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研究背景:近年多重耐药肺结核(MDR-TB)发病率增高、HIV-TB共感染病例增加、及卡介苗保护作用的局限性,促使新型抗结核疫苗的研制迫在眉睫。结核分枝杆菌是胞内菌,因此CD8+T细胞在抗结核免疫应答中发挥重要作用,筛选和鉴定结核抗原特异CD8+T细胞表位对于肽类疫苗的设计和研发具有重要意义。研究目的 :筛选和鉴定结核抗原特异HLA-A*11:01限制性CD8+T细胞表位。方法 :首先,根据相关文献及数据库,从大量结核抗原中筛选了94个免疫优势抗原。然后采用表位预测法Net MHCcons(www.cbs.dtu.dk/services/Net MHCcons),预测HLA-A*11:01限制性CD8+T细胞表位。进一步地,采用肽-HLA置换实验,以验证肽-HLA分子之间的亲和力。在此基础上,采用ELISPOT技术检测表位诱导结核患者PBMC分泌IFN-γ的水平。进而,采用CFSE标记结合流式细胞术,检测肽表位诱导结核患者CD8+T细胞增殖反应。最后,选择免疫原性最强的Rv3130c194-204,制备肽-HLA多聚体,检测结核患者PBMC中是否确实存在Rv3130c194-204肽特异CD8+T细胞。结果 :以亲和力为标准,预测获得50条高亲和力的优势表位,肽-HLA置换实验证实,其中22条表位与HLA-A*11:01的亲和力高于阳性对照肽。ELISPOT检测结果显示,有6条表位可诱导高水平的IFN-γ,且能够被至少30%的结核患者识别,并诱导T细胞发生显著增殖。最后,通过肽多聚体标记,在结核患者PBMC中检测到了Rv3130c194-204肽特异性CD8+T细胞。结论 :本研究找到并鉴定出6条未报道过的HLA-A*11:01限制性CD8+T细胞优势表位,其较强的免疫原性使之有可能成为研发结核疫苗的靶标。