【摘 要】
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目的——microRNA表达可以抑制一系列下游效应基因,从而产生广泛而复杂的生物学效应.miR-17-92基因簇编码了一组microRNA,其中miR-17-5p在膀胱癌中明显表达上调.序列分析
【机 构】
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天津医科大学第二医院 天津市泌尿外科研究所
【出 处】
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第九届全国中西医结合泌尿外科学术会议
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目的——microRNA表达可以抑制一系列下游效应基因,从而产生广泛而复杂的生物学效应.miR-17-92基因簇编码了一组microRNA,其中miR-17-5p在膀胱癌中明显表达上调.序列分析发现miR-17-92基因簇上游启动子区范围内可能存在E2F3结合位点.而E2F3原癌基因在膀胱癌的发生发展中具有重要作用.因此分析miR-17-92基因簇的表达调控对深入了解膀胱癌的生物学基础十分重要.方法——我们使用全血DNA提取试剂盒,采集健康人外周血2ml,并提取基因组DNA,利用Primer 3软件设计miR-17-92基因簇上游启动子区特异的引物若干对,使用高保真聚合酶,扩增目标片段.结果与结论——使用Takara LA Taq、与NEB Phusion Taq等高保真聚合酶以及配套的GC buffer,可以有效扩增目标片段,在成功扩增出此区域长度约1500bp的复杂DNA序列.可供进一步克隆与分析此段序列的启动子活性.
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