洛阳土种鸡IL-2 cDNA的克隆及原核表达

来源 :中国畜牧兽医学会家畜传染病学分会第六届全国会员代表大会暨第11次学术研讨会 | 被引量 : 0次 | 上传用户:nanguo345
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应用RT-PCR技术从新城疫Ⅰ系疫苗诱导的洛阳土种鸡胚脾淋巴细胞中扩增到全长0.43kb的鸡IL-2基因cDNA,将IL-2cDNA克隆到PMD-T载体,测序结果表明,该基因为不含终止密码子的目的基因.将该目的基因克隆到原核表达载体PET-28a,获得的重组质粒PET-28a-IL2经酶切、PCR及序列测定,表明IL-2基因插入的位点、大小与读码框架均正确.PET-28a-IL2在大肠杆菌BL21(DE3)中经IPTG诱导,表达产物经SDS-PAGE电泳分析,在14KD处出现一条约占总蛋白21﹪的蛋白带,表明所克隆的IL-2基囚在大肠杆菌中得到良好的表达,为进一步研究IL-2的生物学特性奠定了基础。
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