【摘 要】
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目的 建立适用于临床,针对恶性肿瘤进行免疫细胞治疗的NK细胞体外培养扩增方法,并对所得效应细胞进行表型鉴定。方法 利用血细胞分离机采集病人外周血单个核细胞,密度梯度离
【出 处】
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安徽省第十二次血液学学术会议暨中国脐血移植协作组第五次会议
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目的 建立适用于临床,针对恶性肿瘤进行免疫细胞治疗的NK细胞体外培养扩增方法,并对所得效应细胞进行表型鉴定。方法 利用血细胞分离机采集病人外周血单个核细胞,密度梯度离心法分离纯化后,在细胞因子IL-2和IFN-γ的参与下,与基因修饰后膜表达IL-15/IL-18/4-1BBL并经照射后全部死亡的滋养层细胞K562进行共培养,于第6、10、14天分别半量换液,以流式细胞术鉴定最终收获细胞表型,并留取细胞悬液,进行血平板的接种、血培养及支原体培养检测。结果 第0、6、10、14天的细胞悬液,经流式测定CD3-/CD56+(即NK细胞)的比例平均分别为11%、31%、49%、72%,其中以第14天的NK所占比例最高,且显著高于刚分离的单个核细胞中NK细胞所占的比例。镜下观察细胞状态良好,经台盼蓝染色测定细胞活度>98%,无细菌、支原体等污染发生。结论 本培养方法能够在体外安全、有效地增殖NK细胞群,满足临床需求。
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