【摘 要】
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将鸭α干扰素(IFN-α)真核表达质粒(pcDNA-DuIFN-α)以1,3,6μg三个剂量基因枪表皮注射免疫28日龄北京鸭,15天后接种DHV弱毒疫苗,同时设空载体+DVH弱毒疫苗、生理盐水、DVH弱毒疫苗以及pcDNA-DuIFN-α免疫鸭对照组,10只鸭/组,于DVH弱毒疫苗免疫后5、7、14、21、28、42、56、70d采用流式细胞仪(FACS)、淋巴细胞增殖试验(MTT法)和鸡胚中和实
【机 构】
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四川农业大学动物科技学院禽病防治研究中心,四川,雅安,625000 四川农业大学动物科技学院禽病防
【出 处】
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中国畜牧兽医学会动物传染病学分会第十二次学术研讨会
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将鸭α干扰素(IFN-α)真核表达质粒(pcDNA-DuIFN-α)以1,3,6μg三个剂量基因枪表皮注射免疫28日龄北京鸭,15天后接种DHV弱毒疫苗,同时设空载体+DVH弱毒疫苗、生理盐水、DVH弱毒疫苗以及pcDNA-DuIFN-α免疫鸭对照组,10只鸭/组,于DVH弱毒疫苗免疫后5、7、14、21、28、42、56、70d采用流式细胞仪(FACS)、淋巴细胞增殖试验(MTT法)和鸡胚中和实验分别对免疫鸭外周血的CD3+淋巴细胞总数、T淋巴细胞转化能力和外周血中和抗体的效价进行动态检测。
结果表明:①CD3+淋巴细胞数量:1、3、6μg的pcDNA-DuIFN-α分别与DVH弱毒疫苗联合免疫后7-56 d极显著高于生理盐水对照鸭,显著高于空载体+DVH弱毒疫苗、DVH弱毒疫苗及其pcDNA-DuIFN-α组；3μg组于28-42 d高于1 μg和6 μg组,1 μg组于28-56 d略高于6 μg组；DVH弱毒疫苗、pcDNA-DuIFN-α和空载体+DVH弱毒疫苗组间差异不显著,于7-56d极显著高于生理盐水对照组。②T淋巴细胞对ConA的反应能力(OD值):1μg、3μg和6μg的pcDNA-DuIFN-α分别与DVH弱毒疫苗联合免疫后5-70 d极显著高于生理盐水对照鸭,21-56 d显著高于空载体+DVH弱毒疫苗、DVH弱毒疫苗及其pcDNA-DuIFN-α组；3 μg组于14-42 d高于1μg和6 μg组,1和6μg无差异；DVH弱毒疫苗、pcDNA-DuIFN-α和空载体+DVH弱毒疫苗组间差异不显著于5-70 d极显著高于生理盐水对照组。③中和抗体效价:7-70d时1、3、6μg三个剂量组高于DHV和空载体+DHV组,3μg组高于1和6μg组。研究表明pcDNA-DuIFN-α是一种优秀的鸭免疫分子免疫增强剂和DVH弱毒疫苗的分子佐剂,以基因枪注射3μg/只的效果最佳.
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将本实验室构建的鸭α-干扰素基因疫苗(pcDNA-SDIFN-α)分别按每只1、3和6μg三个剂量基因枪轰击免疫北京谷鸭,以PBS、空载体质粒pcDNA 3.1(+)和鸭瘟弱毒疫苗为对照,免疫15 d后分经皮下、滴鼻、口服三个途径人工感染0.5 LD50鸭瘟强毒(含病毒DNA拷贝数为3.524×104),统计发病死亡情况,并于攻毒后2 h、6h、12 h、24h、3d、6d、9d、14d、22d、
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