目的:建立一种特异、敏感、快速检测幽门螺杆菌的TaqMan MGB探针实时荧光定量PCR方法。方法:针对幽门螺杆菌cagA基因的保守区设计特异性引物和探针,建立幽门螺杆菌TaqMan MGB探针实时荧光定量PCR检测方法,验证方法的特异性、敏感性和稳定性,对550份小型猪、猴、犬、兔、金黄地鼠、豚鼠、大鼠、小鼠样本进行检测,并与细菌分离培养方法作比较。结果:建立的TaqManMGB探针实时荧光定量PCR方法对幽门螺杆菌的检测具有高度的特异性,对空肠弯曲菌、泰泽氏菌、侵肺巴斯德氏菌、大肠埃希菌、铜绿假单胞菌均无交叉反应,检测的灵敏度达22 copies,标准曲线显示各浓度范围内具有良好的线性关系,相关系数(R~2)为0.998,斜率为-3.709,TqMan MGB探针实时荧光定量PCR效率为100%,组内和组间重复性试验Ct值变异系数分别在o.19%～2.5%和o.16%～3.4%之间。对550份动物样本进行TaqManMGB探针实时荧光定量PCR检测和常规细菌分离培养检测,结果TaqManMGB探针实时荧光定量PCR检出40份阳性,而常规细菌分离培养则仅检出2份阳性,结果显示建立的TaqMan MGB探针实时荧光定量PCR方法比常规细菌分离培养方法更敏感,能够直接从动物样本中检测出幽门螺杆菌DNA,检测时间仅为40 mmin。结论:研究建立的TaqMan MGB探针实时荧光定量PCR方法具有可靠、特异、敏感的特点,适用于幽门螺杆菌的快速检测。