【摘 要】
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为了制备猪流行性腹泻病毒(PEDV)M蛋白单克隆抗体(MAb),本研究以截短表达的His-M重组蛋白免疫BABL/c小鼠:以截短表达的GST-M重组蛋白作为包被抗原,采用常规的淋巴细胞杂交瘤技术制备杂交瘤细胞,通过间接ELISA进行筛选,得到一株稳定分泌抗M蛋白MAb。MAb亚类鉴定为IgG2b型,轻链为k链,杂交瘤细胞培养上清和诱导的小鼠腹水抗体效价分别为1:3000和1:(2×105)。Wes
【机 构】
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中国农业科学院哈尔滨兽医研究所,兽医生物技术国家重点实验室猪传染病研究室,黑龙江哈尔滨 150001
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为了制备猪流行性腹泻病毒(PEDV)M蛋白单克隆抗体(MAb),本研究以截短表达的His-M重组蛋白免疫BABL/c小鼠:以截短表达的GST-M重组蛋白作为包被抗原,采用常规的淋巴细胞杂交瘤技术制备杂交瘤细胞,通过间接ELISA进行筛选,得到一株稳定分泌抗M蛋白MAb。MAb亚类鉴定为IgG2b型,轻链为k链,杂交瘤细胞培养上清和诱导的小鼠腹水抗体效价分别为1:3000和1:(2×105)。Western blot验证明该MAb能够识别重组及天然的PEDVM蛋白。IFA试验表明该MAb能够与PEDV感染的Veto E6细胞产生特异性免疫荧光。
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