【摘 要】
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辣椒脉斑驳病毒(Chilli veinal mottle virus,ChiVMV)和辣椒环斑病毒(Chilli ringspot virus,ChiRSV)是亚洲地区辣椒上两种主要的Potyvirus.Vp、PIPO是Potyvirus复制和侵染过程时的关键蛋白,本研究利用ChiRSV和ChiVMV各自的Vpg和PIPO全长序列,构建了4个酵母双杂交诱饵载体:pGBKT7-ChiRSV-Vpg(
【机 构】
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中国热带农业科学院热带生物技术研究所农业部热带作物生物学与遗传资源利用重点开放实验室,海南海口571101;海南大学环境与植物保护学院,海南海口570228
【出 处】
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中国热带作物学会遗传育种专业委员会2013年度学术研讨会
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辣椒脉斑驳病毒(Chilli veinal mottle virus,ChiVMV)和辣椒环斑病毒(Chilli ringspot virus,ChiRSV)是亚洲地区辣椒上两种主要的Potyvirus.Vp、PIPO是Potyvirus复制和侵染过程时的关键蛋白,本研究利用ChiRSV和ChiVMV各自的Vpg和PIPO全长序列,构建了4个酵母双杂交诱饵载体:pGBKT7-ChiRSV-Vpg(RV)、pGBKT7-ChiRSV-PIPO(RP)、pGBKT7-ChiVMV-Vpg (W)和pGBKT7-ChiVMV-Vpg (VP).利用冷LiCl法将构建好的载体转化酵母菌株Y2HGlod,并利用缺陷培养进行自激活和毒性鉴定,结果表明,VP载体能激活MEL1和HIS3两个报告基因,其他载体均无自激活现象;在SD/-Trp上,含有诱饵载体与含有对照质粒的酵母菌所生长的菌落大小相近,表明诱饵载体对酵母菌无毒性作用.因此,RV、RP和VV可用于酵母双杂交,为研究Vpg、PIPO与寄主的互作的分子机制提供基础.
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