【摘 要】
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目的：为了建立可特异性地检测血清中抗小反刍兽疫病毒(PPRV)抗体。方法：对具有PPRV特异性的N蛋白第1V区域进行扩增，并克隆至原核表达载体pET-32a(+)载体中，用于PPRV N亚单位重组蛋白的表达。用纯化的重组蛋白作为检测抗原，建立了检测血清中存在的抗PPRV抗体的间接ELISA方法，并对间接ELISA抗原包被量、血清稀释倍数、血清孵育时间等反应条件进行了优化。结果：western bl
【机 构】
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中国农业科学院北京畜牧兽医研究所动物营养学国家重点实验室，北京 100193 四川省华派生物制药有限公司，四川简阳 641401
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目的：为了建立可特异性地检测血清中抗小反刍兽疫病毒(PPRV)抗体。方法：对具有PPRV特异性的N蛋白第1V区域进行扩增，并克隆至原核表达载体pET-32a(+)载体中，用于PPRV N亚单位重组蛋白的表达。用纯化的重组蛋白作为检测抗原，建立了检测血清中存在的抗PPRV抗体的间接ELISA方法，并对间接ELISA抗原包被量、血清稀释倍数、血清孵育时间等反应条件进行了优化。结果：western blot结果表明，重组蛋白具有良好的反应原性。所建立的间接ELIsA方法可以鉴别血清中的PPRV抗体和RP(牛瘟)抗体，具有良好的特异性和灵敏性，与标准竞争ELISA试剂盒的符合率达98.4％。结论：本研究建立了一种具有良好的特异性和灵敏性的检测血清中存在的抗PPRV抗体的间接ELISA方法。
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