葛根素抗心肌氧化损伤作用机制研究

来源 :中华医学会第十五次全国心血管病学大会 | 被引量 : 0次 | 上传用户:xiaodaoluan
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目的:葛根素(Puerarin,Pue)在心血管疾病的防治中有较广泛的应用。本研究应用大鼠心肌H9c2细胞氧化应激损伤模型,通过分子生物学手段探讨在氧化应激诱发的心肌细胞损伤中,葛根素发挥的保护作用及其具体机制.方法:本研究用H2O2处理大鼠胚胎心脏组织来源的H9c2细胞,建立心肌细胞氧化应激损伤模型。采用MTT法观察Pue对细胞增殖的影响,应用激光扫描共聚焦显微镜成像法检测线粒体特异性荧光染料四甲基罗丹明乙酯,观察细胞线粒体膜电位的变化,以证明Pue通过抑制线粒体通透性转移孔的开放,从而产生心肌线粒体保护作用,同时确定Pue的最适保护浓度。通过Western blot法检测Pue对SAPK/JNK,p38MAPK等上游信号因子活性的影响,明确Pue发挥心脏保护作用的具体信号转导机制。结果:1.H2O2处理H9c2细胞20 min后,通过激光扫描共聚焦显微镜检测,显示TMRE荧光强度明显减弱,与H2O2对照组相比,Pue处理组(0.1μM)荧光减弱程度明显减轻,提示Pue可以减轻氧化应激引起的线粒体损伤。2.采用MTT法检测细胞增值率,与对照组相比,0.1μM Pue处理组吸光度明显增加,证实了Pue具有心肌保护作用。结论:Pue在心肌氧化应激损伤时,可能通过抑制JNK活性,抑制mPTP的开放,从而发挥心脏保护作用。
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