【摘 要】
：
根据猪流感病毒(SIV)的M基因序列设计了一对特异性引物M1/M2,扩增出大小为229bp的目的片段。针对这个基因片段,再设计合成4条寡核苷酸探针,其中反向引物的5端用荧光素Cy3标记。以荧光标记不对称PCR技术为基础,通过将单链PCR产物与芯片杂交实现对SIV的检测,建立SIV的基因芯片检测方法。利用该方法对39份猪组织样品进行检测,与RT-PCR检测方法相比,本方法具有良好的特异性和敏感性。试
【机 构】
：
华南农业大学兽医学院,广东广州 510642;黑龙江省兽医卫生防疫站,黑龙江哈尔滨 150090
【出 处】
：
第三次全国免疫诊断暨疫苗学术研讨会
论文部分内容阅读
根据猪流感病毒(SIV)的M基因序列设计了一对特异性引物M1/M2,扩增出大小为229bp的目的片段。针对这个基因片段,再设计合成4条寡核苷酸探针,其中反向引物的5端用荧光素Cy3标记。以荧光标记不对称PCR技术为基础,通过将单链PCR产物与芯片杂交实现对SIV的检测,建立SIV的基因芯片检测方法。利用该方法对39份猪组织样品进行检测,与RT-PCR检测方法相比,本方法具有良好的特异性和敏感性。试验结果表明用该方法快速检测组织中SIV是可行的,对该病的快速诊断和分子流行病学调查具有重要意义。
其他文献
近年来,随着当代生物技术的研究和应用取得高速发展,发光免疫分析技术已广泛应用于医学检测领域,本文简要综述目前应用于我国病毒性肝炎血清学标志物的发光免疫学检测方法。
我中心近年经常收到筛查阳性母婴传播婴儿血标本,其中2005年10由省人民医院送检的一例1岁零4个月婴儿初筛阳性标本,其症状较典型,结果报告。
目的:了解陕西省近年来发现的艾滋病病毒(HIV)感染者所携带毒株的基因序列特征、亚型种类和毒株来源以及在各高危人群中的分布,推断其传播来源和流行趋势,为本省艾滋病防治工作提供技术资料。方法:对HIV感染者进行流行病学相关因素调查,无菌采集HIV感染者抗凝全血,提取前病毒DNA,应用套式聚合酶链式反应(nested-PCR)扩增其膜蛋白基因(env),对其C2-V3区及邻区的核苷酸序列进行测定,用W
蓝舌病是一种重要的反刍动物传染病,一旦爆发将对国际贸易和社会经济造成极其严重的损失。本研究建立了一种新型的蓝舌病病毒(Bluetongue virus, BTV)荧光定量检测技术,可实现对不同血清型BTV NS1基因的快速、可靠检测。利用该技术对随机抽取的8个不同血清型BTV毒株进行检测以验证该方法的有效性;利用所构建的质粒参考品P120(含待检序列)及病毒参考品对该技术进行特异性、敏感性、重复性
目前蓝舌病病毒(BTV)已发现25个血清型。对BTV进行快速、可靠的群特异性检测极为重要,因此本研究设计了适用于BTV群特异性检测的一对独特引物,并进行了评价。利用DNAstar软件对不同血清型BTV保守基因VP7及NS1分别进行序列比对,发现NS1基因的5端为最保守片段,针对BTV保守基因的保守片段设计了一对通用型引物。Blast软件分析引物与GenBank发表的病毒基因的同源性,显示引物特异性
目的:本研究中我们观察了弓形虫可溶性速殖子抗原(solubletachyzoite antigen, STAg)经滴鼻、灌胃和皮下注射三种途径免疫小鼠诱导的免疫应答。方法:6~7周龄BALB/c小鼠32只随机分为4组,分别以20μg STAg滴鼻、灌胃或皮下注射免疫小鼠2次,间隔2周,对照组不做处理。末次免疫后14天脱颈椎处死全部小鼠,分离脾淋巴细胞和肠上皮内淋巴细胞(intraepithelia
小反刍兽疫( PPR)是由小反刍兽疫病毒( PPRV)引起的一种山羊、绵羊等小反刍兽类的急性接触传染性疾病,属于国际动物卫生组织密切关注的法定报告传染病。是我国新发的动物传染病。PPR病毒属于副粘病毒科麻疹病毒属。它的基因组由单股负链无节段RNA组成,RNA链从3至5依次分布着N-P-M-F-H-L 6个基因。H蛋白构成病毒的纤突,具有血凝素和神经氨酸酶活性,含有T细胞抗原决定簇。本实验用PPR-
血凝素-神经氨酸酶(HN)是新城疫病毒(NDV)的主要免疫抗原之一。在这项研究中,通过将HN基因同源重组进禽腺病毒构建重组病毒rFAdV-9,并且在禽腺病毒晚期启动子的控制下表达NDV的HN基因,运用northern blot, RT-PCR和放射免疫沉淀的方法检测到HN基因的表达,希望可以用这种重组病毒制得较好的预防NDV的基因工程疫苗。
人感染猪链球菌起病急骤,毒血症状严重,病情凶险,进展快,预后差,死亡率高。猪链球菌的致病机理还不甚清楚。了解该菌感染的免疫,对阐明其致病机理、建立诊断方法和研制开发有效的预防及治疗性疫苗具有重要的指导意义。本文就猪链球菌感染的免疫研究从非特异性免疫、特异性免疫和免疫预防三方面进行了综述。
弓形虫主要通过自然感染途径--经口感染,引起人和温血动物的弓形虫病。弓形虫可能是世界上人类感染最普遍的寄生虫。弓形虫入侵宿主首先要通过黏膜组织的严密防御系统,即黏膜免疫系统,它是机体抗感染的第一道免疫屏障,诱导黏膜免疫应答。在共同黏膜免疫系统(CMIS)的作用下,全身多处黏膜相关淋巴组织(MALT)的免疫活性细胞被激活,黏膜部位产生大量sIgA抗体,并形成庞大的免疫应答网络,发挥抗虫效应。本文将就