【摘 要】
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苎麻是我国特有的经济作物,苎麻根腐线虫病是严重危害苎麻生长的重要病害,其病原主要为短体属的咖啡短体线虫(Pratylenchus coffeae).研究表明,pat-10基因对虫体肌肉收缩以及胚胎的生长发育都相当重要.通过RNA干扰使该基因沉默可导致线虫的瘫痪、幼虫和胚胎的致命性以及雌虫不育.因此,克隆该基因并进行dsRNA植物表达载体的构建,对利用RNAi防治苎麻根腐线虫病具有重要意义.我们从沅
【机 构】
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湖南农业大学植物保护学院,湖南长沙410128;湖南省农业科学院植物保护研究所,湖南长沙410125
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苎麻是我国特有的经济作物,苎麻根腐线虫病是严重危害苎麻生长的重要病害,其病原主要为短体属的咖啡短体线虫(Pratylenchus coffeae).研究表明,pat-10基因对虫体肌肉收缩以及胚胎的生长发育都相当重要.通过RNA干扰使该基因沉默可导致线虫的瘫痪、幼虫和胚胎的致命性以及雌虫不育.因此,克隆该基因并进行dsRNA植物表达载体的构建,对利用RNAi防治苎麻根腐线虫病具有重要意义.我们从沅江、张家界、望城等湖南主要苎麻产区采集根及根围土壤样品,分离获得P.coffeae.运用GenBank中登录的Pc-pat-10序列设计引物pat10-F/Pat10-R,通过硅粒吸附法对线虫进行RNA提取、RT-PCR等分子克隆操作,获得440 bp基因序列,与GenBank中登录的P.Coffeae、玉米短体线虫(Pratylenchus zeae)及南方根结线虫(Meloidogyne incognita)pat-10基因进行比对,同源性为98％、86％和80％.根据该基因序列,设计含有限制性内切酶酶切位点(Asc I、SwaI、SmaI、XbaI)的引物.构建了含有pat-10基因的反向重复dsRNA植物表达载体.为利用RNAi进行转基因育种打下基础.
其他文献
在对深圳市观赏植物线虫病害进行调查监测过程中,从生长不良的观赏植物根际采集的样品中分离到多种植物线虫,其中从棕榈科的散尾葵和袖珍椰子根际采集分离的2种植物线虫,根据形态学特征,鉴定为粗尾矮化线虫(Tylenchorhynchus crassicaudantus Williams1960)和马舒德矮化线虫(Tylenchorhynchus mashhoodi Siddiqi&Basir, 1959)
根际微生物对作物的生长有十分重要的作用,施入不同的药剂将对根际微生物的种群数量产生差异显著的影响,本文采用石榴园小区试验,以杀线剂(万寿菊发酵液、呋喃丹、福气多、宝地尔)和生物肥料(菌丝蛋白、红土运、多肽宝)为材料,探讨杀线剂和生物肥料对石榴根际可培养微生物的影响.结果表明:生物肥料红土运对石榴根际可培养微生物影响最显著,用量为0.3kg/株的处理使石榴根际细菌、真菌、放线菌、芽胞杆菌的数量都显著
在温室内,通过盆栽方式,对黄瓜连作,黄瓜分别与葱、水生空心菜、木耳菜和茼蒿4种蔬菜或水稻轮作后南方根结线虫的种群动态变化进行了研究.研究结果表明,对黄瓜根结线虫病的防控效果最好的是黄瓜与水稻轮作,其次是黄瓜与葱轮作、与种植期为25d的木耳菜或苘蒿轮作、与种植期为25～35d的水生空心菜轮作,之后依次是黄瓜与种植期为15d的水生空心菜或种植期为35d的苘蒿轮作以及与种植期为15d的木耳菜轮作,且所有
根结线虫是一类重要的植物专性寄生线虫，它能够通过分泌效应蛋白来抑制植物的先天免疫系统.本实验室从2013年Haegeman等人发表的拟禾本科根结线虫(Meloidogyne graminicola)转录组中克隆得到一个Mi-Map同源基因Mg-Map.Map基因广泛存在于植物根结线虫中，被认为是根结线虫所特有的基因.目前，已经从南方根结线虫，爪哇根结线虫扩增得到不同类型的Map基因，初步研究表明这
根结线虫(Meloidogyne sp.)是水稻的重要病原线虫，为害水稻的种类有10余种.其中以拟禾谷科根结线虫(Meloidogyne graminicola)对水稻最具有危险性和破坏力的，主要分布于热带和亚热带地区，可导致水稻减产11％ ～ 80％.近年来随着全球气候变化，拟禾谷科根结线虫病害有扩大的趋势.
肾形肾状线虫(Rotylenchulus reniformis)是一种根部半内寄生性线虫，通常发生在热带、亚热带及一些温暖潮湿的地区，寄主范围非常广，达300种植物，危害严重，是棉花、甘薯和风梨等植物上的重要病原线虫。
禾谷孢囊线虫(cereal cyst nematode, CCN)是麦类作物上的一种内寄生病原线虫,我国已发现危害的有禾谷孢囊线虫(Heterodera avenae)和菲利普孢囊线虫(Hfilipjevi)两个种,20世纪90年代首先在湖北省天门县发现小麦田发生禾谷孢囊线虫,随后蔓延至及湖北、河南、河北、山东、山西、陕西、北京、天津、安徽、江苏、宁夏回族自治区、甘肃、青海、西藏自治区、内蒙古自治
根结线虫病是为害黄瓜、番茄等大棚蔬菜的主要病害之一，严重制约我国设施蔬菜的发展。我国北方大部分温室蔬菜都感染了根结线虫病，平均减产30％左右，造成了严重的经济损失。为了有效地控制根结线虫的危害，大部分农户采用化学杀线虫剂防治根结线虫。化学防治虽然效果好，但其造成的农药残留和环境污染等问题越来越受到人们的重视，加之一些熏蒸性杀线虫剂使用方法复杂、成本较高且占用的生产周期较长，使其在生产上的应用受到了
香蕉穿孔线虫(Radopholus similis)是我国特别关注的重要的植物检疫性线虫之一，全国口岸多次截获，在出口的农产品中也被韩国截获到该线虫，从而导致我国部分农产品出口受阻。本研究旨在建立多种香蕉穿孔线虫的快速检测方法。通过对香蕉穿孔线虫ITS区域序列分析，利用在线软件Primer Explorer V4设计香蕉穿孔线虫特异环介导等温扩增(LAMP)的内、外引物各1对，环引物1对；香蕉穿孔
蠕虫埃斯特菌(Esteya vermicola)是首次报道寄生松材线虫(Bursaphelenchus xylophilus)的一种食线虫真菌，各种胞外酶尤其是丝氨酸蛋白酶(serine protease)在其侵染松材线虫的过程中起着至关重要的作用。本研究从蠕虫埃斯特菌菌株NKF 13222中克隆到一个丝氨酸蛋白酶基因并对其功能进行了分析，旨在探索该菌株与植物寄生线虫互作中的寄生/侵染机制。