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目的：建立同时检测实验动物中的流感嗜血杆菌、溶血嗜血杆菌和多杀巴斯德杆菌多重实时荧光定量PCR(qPCR)检测方法.
方法：分别根据三种病原菌的Hpd基因和KMT1基因设计特异性引物和Taqman探针,经特异性、敏感性和重复性验证,建立多重qPCR检测方法,并对822份实验动物呼吸道样本进行检测应用.
结果：所建立的多重qPCR方法与其他29种病原菌间无交叉反应,对三种病原菌的检测限可达到10个拷贝/uL.树鼩样品中溶血嗜血杆菌和多杀巴斯德杆菌的阳性率分别为10％(6/60)和21.7％(13/60),其他实验动物中均未检出上述三种病原菌.
结论：本研究所建立的多重qPCR检测方法,可快速检测实验动物中的上述三种呼吸道病原菌.