特异性噬菌体探针的高通量筛选及其在生物分析和生物传感中的应用

被引量 : 0次 | 上传用户:liuj_csip
下载到本地 , 更方便阅读
声明 : 本文档内容版权归属内容提供方 , 如果您对本文有版权争议 , 可与客服联系进行内容授权或下架
论文部分内容阅读
将随机八肽通过主要衣壳蛋白pVIII展示于丝状噬菌体fd-tet表面,从而获得f8/8风景噬菌体文库。因其具有许多优良特性,如多肽展示效价高、稳定性好、结构高度均一等,是靶向配体筛选的理想材料。在本报告中将汇报本课题组基于f8/8风景噬菌体文库高通量筛选特异性噬菌体探针用于生物分析和生物传。针对游离前列腺抗原(fPSA),筛选获得了风景噬菌体单克隆。随后,亲和性和特异性好的噬菌体单克隆作为捕获探针,联合针对PSA的单克隆抗体,首次提出了基于噬菌体的酶联免疫吸附法(ELISA)。与免疫吸附实验相比,该策略具有简单、廉价、高效等优势。另外,以产自T.reesei菌株QM9414纤维素酶系的内切葡聚糖酶II(EG I)为模型,采用噬菌体展示技术,从f8/8风景噬菌体文库中,成功筛选获得了特异性结合EG I的八肽配体,其氨基酸序列为EGSDPRMV。以八肽配体EGSDPRMV为模式,借助对称载体Ff噬菌体,直接固定风景噬菌体EGSDPRMV,构筑多肽芯片。结果表明,噬菌体EGSDPRMV介导的多肽芯片,其产生的荧光信号重现性更好,荧光强度更高,灵敏度更好,这主要是由于每一斑点中所固定多肽的浓度得到了明显提高。此外,该固定策略还不受多肽配体组成的影响,并且固定的多肽配体拥有自由的氨基端。因此,风景噬菌体文库技术有望在生物分析领域中高效、廉价的的生物分子探针制备中发挥重要作用。
其他文献
<正>在声乐艺术中,情感起主导作用,是声音的灵魂。注意观察生活,是创造艺术的源泉,能帮助我们产生灵感和激情,能使我们准确地、深刻地理解作品、表现作品。演唱作品不单只是
维生素D是机体内维持钙磷代谢稳定的重要物质,临床用于治疗骨质疏松以及甲状旁腺功能亢进。有证据显示日晒减少以及摄入不足导致的维生素D缺乏症与心血管疾病以及慢性肾脏疾
在近万年的历史长河中,云南各民族创造了丰富多彩的稻作文化及其水文化。着眼于水,首先从云南各民族的自然观和认知适应自然的角度考察传统稻作文化中水源的涵养保护和稻田灌
2015年初以来,也门局势动荡急剧升级。2月6日,也门胡塞武装组织宣布成立总统委员会和全国过渡委员会;3月26日,应也门总统哈迪求助,沙特等国对胡塞武装展开越境军事打击。也门
《伊豆的舞女》是川端康成早期的代表作,是一篇自传性质的杰出的短篇小说,在各国读者中产生了深远的影响。《伊豆的舞女》曾先后6次被搬上银幕,最有名的是1974年由山口百惠与
对110kV电力变压器组合式调压绕组结构的漏磁场进行了分析。
秦皇岛是著名的旅游城市,旅游业对秦皇岛的经济建设和社会发展起着积极的促进作用。本文通过分析秦皇岛旅游业发展的现状,明确存在的主要问题,提出有实践指导意义的对策,为早
本研究以9个对酸性土壤反应不同的玉米自交系以及它们的部分杂交、回交世代为材料,采用营养液培养、根箱分室土培等方法,研究了玉米自交系的根系形态解剖特征、根系分泌物、根
<正>广播面对着以网络和手机为代表的新媒体的巨大冲击,正以前所未有的速度、广度和深度进行着裂变和整合,近年来这种裂变和整合的趋势进一步加快。这表明在当前媒介融合的环