【摘 要】
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根据乙型脑炎病毒SA14和SA14-14-2株序列，设计并合成1对针对E基因的特异性引物，用RT-PCR方法扩增出JBV GZ株E基因片段，将其与pMD19-T载体连接，并转入Top10感受态细胞中，通过抽提阳
【机 构】
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贵州大学动物科学学院,贵州 贵阳 550025
【出 处】
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中国畜牧兽医学会养猪分会2009年学术年会暨四届四次常务理事扩大会
论文部分内容阅读
根据乙型脑炎病毒SA14和SA14-14-2株序列，设计并合成1对针对E基因的特异性引物，用RT-PCR方法扩增出JBV GZ株E基因片段，将其与pMD19-T载体连接，并转入Top10感受态细胞中，通过抽提阳性质粒酶切鉴定并测序后，将目的片段定向克隆到pET32a(+)中，转化入BL21感受态细胞，经IPTG诱导进行表达。结果表明：表达的目的蛋白经SDS-PAGE和Western blotting分析证实确为乙型脑炎病毒E蛋白且有生物学活性，该研究为JEV早期诊断试剂盒和基因工程疫苗的研制奠定了一定的基础。
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