【摘 要】
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目的自噬是一种自我消化过程,可消除受损或老化的蛋白质和潜在毒性的细胞内成分,以维持体内平衡。之前我们证实了TNF-α对成骨细胞分化,矿化和细胞凋亡起着至关重要的作用,但
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目的自噬是一种自我消化过程,可消除受损或老化的蛋白质和潜在毒性的细胞内成分,以维持体内平衡。之前我们证实了TNF-α对成骨细胞分化,矿化和细胞凋亡起着至关重要的作用,但TNF-α对成骨细胞自噬的影响尚不清楚。本研究旨在研究TNF-α是否能够诱导成骨细胞自噬,并确定潜在的机制。材料与方法本研究采用永生化小鼠成骨细胞系OCCM-30。用TNF-α刺激24h后,用透射电子显微镜(TEM)检测细胞,并且通过细胞免疫荧光法检测LC3B。随后,通过q RT-PCR检测LC3A和Beclin-1的表达。用不同浓度的TNF-α刺激细胞不同时间后,采用Western blotting法检测Atg-5和Beclin-1。使用特异性抑制剂和si RNA转染研究了信号转导和转录激活因子3(Stat3)信号通路在自噬过程中的作用。结果 TNF-α诱导OCCM-30细胞自噬,经TNF-α处理后,Atg-5和Beclin-1的表达增加并表现出时间依赖性和浓度依赖性。Stat3信号通路被TNF-α激活,并且Stat3信号通路被抑制后自噬相关蛋白的表达下调。结论本研究提示TNF-α能够诱导OCCM-30细胞自噬。该过程依赖于刺激Stat3信号通路,并且自噬通过阻断该信号通路而下调。
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