论文部分内容阅读
【目的】对阿司匹林于香酚酯进行鼠伤寒沙门氏菌回复突变试验,评价该化合物是否具潜在致突变性。【方法】以鼠伤寒沙门氏菌突变型菌株TA97、TA98、TA100、TA102为试验菌株,以及由多氯联苯（PCB）诱导的大鼠肝匀浆（S-9）制备的S-9混合液为代谢活化系统,经平板掺入法后计数各菌株回复突变菌落数。各菌株中,TA97和TA98可以检测各种移码型诱变剂;TA100、TA1535可以检测引起碱基对置换的诱变剂;TA102可以检测其他测试菌株不能检出或极少检出的诱变剂;S-9混合液则用以代谢活化某些需要代谢酶才能使沙门氏菌突变型产生回复突变的诱变剂。各菌株经特性鉴定后均符合Ames试验标准,S-9生物活性鉴定合格。AEE的LD50为10.39g/kg,故最高剂量设为50mg/ml,中间剂量为25mg/ml、12.5mg/ml、6.25mg/ml,低剂量为3.125mg/ml;同时设阳性诱变剂（叠氮钠、2-氨基芴）对照组、溶剂（DMSO）对照组、空白对照组、阿司匹林对照组、于香酚对照组,各组均包括加S-9和不加S-9两种情况,各剂量分别做三个平行平皿。试验时将培养至对数生长期的增菌培养液100ul加入2ml顶层培养基中,混匀;加各浓度AEE100ul,活化时需要加入S-9混合液500ul,再混匀,迅速倒入底层培养基上,转动平皿使顶层培养基均匀分布,固化后放入37℃恒温培养箱培养48h,观察结果。双盲法阅片,以以下公式计算突变率:突变率=诱发回变菌落数/自发回变菌落数。【结果】在不同浓度下,无论加或不加S9,各剂量组均未引起回复突变菌落数明显增加,亦无线性关系。【结论】Ames实验是国际上普遍认可的化合物致突变检测方法,其灵敏度和可靠性毋庸置疑,本实验将AEE与标准菌液混合后在最低营养条件下培养,计算突变率,并且分别做了+S9和-S9两种情况,在实验当中严格无菌操作,排除了各种外界环境导致的假阴性结果。结果显示,各受试物剂量组回复突变菌落数在有无S9情况下其突变率均未达到自发回变菌落数的二倍,其表明AEE无致突变性。