目的:研究DEN2体外诱导Ana-1极化和对其TLR7表达的影响,探讨巨噬细胞极化及TLR7在DEN致病过程中的作用。方法:RT-PCR、直接免疫荧光法鉴定DEN2感染Ana-1细胞;Q RT-PCR检测DEN2感染Ana-1细胞24h、72h、120h病毒载量、iNOS、Arg-1、IL-10、IL-12p40mRNA水平;Western blot检测iNOS、Arg-1、TLR7蛋白表达;双抗体夹心ELISA法检测细胞培养上清中TNF-α的浓度。实验数据采用单因素方差分析进行组间比较。结果:1.被DEN2感染的Ana-1细胞病毒载量在72h最高,120h最低。2-ΔΔCt值分别为159.98±37.80、3.69±0.38,差异有统计学意义(P<0.05)。2.DEN2感染组、M1型极化对照组iNOS mRNA水平较正常组及M2型极化对照组显著升高(P<0.05),72h达峰值,2-ΔΔCt值分别为29.09±3.70、18.35±3.52。感染组、M1型极化对照组Arg-1 mRNA水平明显低于M2型极化对照组(P<0.05)。DEN2感染组、M1型极化对照组iNOS蛋白均高于正常对照组及M2型极化对照组,Arg-1蛋白则低于M2型极化对照组。3.DEN2感染组IL-10 mRNA水平在72h达峰值,2-ΔΔCt值为1.21±0.69与同期正常对照组相比,差异无统计学意义(P>0.05)。M1、M2型极化对照组IL-10 mRNA水平均低于正常对照组。DEN2感染组IL-12p40 mRNA水平在72h达峰值,2-ΔΔCt值为11.1±2.41明显高于M2型对照及正常对照组,差异有统计学意义(P<0.05)。4.DEN2感染组、M1型极化对照组细胞培养上清中TNF-α水平明显高于M2型极化对照组及正常对照组,72h达峰值,分别为454.72±13.41、372.02±12.14pg/ml。5.DEN2感染组TLR7蛋白低于同期正常对照组,且呈逐渐下降趋势。M1、M2型极化对照组较正常对照组无明显差异(P>0.05)。结论:1.DEN2能够感染Ana-1细胞并诱导其向M1型极化,M1型极化程度与病毒载量呈正相关。2.DEN2感染Ana-1细胞后其TLR7表达下调,Ana-1细胞M1、M2型极化对TLR7表达无明显影响。3.Ana-1产生TNF-α水平与细胞内DEN病毒载量呈正相关。