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神经再生素(Nerve Regeneration Factor,NRF)是从中药牛膝(Achyranthes bidentata BL)中提取的有效组分(中国发明专利申请号:200710019780.4),主要成分为甾酮、多糖和多肽。本研究采用胚鼠海马神经元体外培养,通过形态分析、免疫荧光细胞化学法、实时荧光定量PCR、Western blot及基因芯片技术,观察NRF促神经生长作用,并初步探讨其作用机制。采用兔腓总神经损伤模型,通过形态学分析、电生理检测等方法,观察NRF对兔腓总神经损伤修复的促进作用。结果表明NRF具有促进体外培养的海马神经元生长的作用,这种作用存在明显的剂量反应关系和时间依赖性。Affymetrix大鼠全基因组芯片分析结果表明,检测的15866个基因中,248个基因上调,316个基因下调,其中25个上调和47个下调基因有显著性差异表达。这些差异表达的基因,有G蛋白偶联受体、信号转导分子、细胞组分、生物过程生长代谢调控因子、免疫蛋白、酶和凋亡的调控因子等。兔行腓总神经夹伤术,术后将经耳缘静脉注射给预NRF4周。电生理检测发现NRF能显著增强损伤近、远段神经干动作电位传导速度;形态学分析结果显示,NRF可增加腓总神经损伤动物脊髓前角运动神经元的存活率,并增加损伤神经再生髓鞘数;组织学和超微结构观察发现,NRF组损伤神经有髓神经纤维的髓鞘形态、厚度、成熟度均优于空白对照组,变性纤维的数目少于空白对照组。本研究结果提示,牛膝提取物NRF具有促进体外培养的海马神经元生长、促进兔腓总神经损伤修复的作用。通过研究,为将牛膝提取物神经再生素开发为促神经生长、防治神经退行性变的中药新药提供实验依据。