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研究背景:中枢免疫耐受对于免疫系统识别自身和非自身,从而清除外来异物,维持对自身成分的不反应性是必不可少的。研究表明,NF-κB信号传导通路对于胸腺髓质微细构造的形成和维持特别是诱导胸腺髓质上皮细胞的分化和成熟,进而控制机体的中枢免疫耐受是必须的,肿瘤坏死因子受体相关因子6(TNF-receptor associated factor 6,TRAF6)是该信号通路中必不可少的信号传导分子,发挥着中心作用,其机制之一可能是通过诱导自身免疫调节因子(autoimmune regulator,AI RE)以及外周组织特异性抗原(tissue-specific antigens,TSA)的表达实现的。中枢免疫耐受的异常或者缺乏导致多种自身免疫疾病的发生;此外,近来的研究也提示中枢免疫耐受与妊娠等生理过程以及癌症等病理过程有着密切的关联。发展和建立一个中枢免疫耐受缺损模型对于开展中枢免疫耐受的相关研究具有重要的意义。目的:构建基于shRNA介导的中枢免疫耐受缺损模型。方法:分离妊娠后13.5天的胎鼠胸腺,除去淋巴细胞,获得原代胸腺基质细胞,利用慢病毒将小鼠TRAF6基因特异性shRNA慢病毒质粒(LV-T6-shRNA)导入原代胸腺基质细胞中,重新聚集这些胸腺基质细胞得到LV-T6-shRNA重塑胸腺,将此重塑胸腺移植入无胸腺的雌性小鼠肾脏荚膜下,饲养8周。结果:慢病毒可有效转导LV-T6-shRNA慢病毒质粒入原代胸腺髓质上皮细胞中;移植LV-T6-shRNA重塑胸腺的小鼠饲养8周后,胸腺明显较小,成熟的胸腺髓质上皮细胞减少,脾脏肿大,脾脏中活化的T淋巴细胞增多,肺脏中出现淋巴细胞浸润等现象,这些表现型与TRAF6-/-小鼠的表现型相似。结论:中枢免疫耐受缺损模型构建成功。