【摘 要】
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β-1,3-葡聚糖是真菌细胞壁的主要成份,其合成酶的调节亚基Rho1对维持细胞壁完整性及真菌形态具有重要意义,而Rho1对烟曲霉形态及生理功能的影响及可能调控机制仍不清楚
【机 构】
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军事医学科学院疾病预防控制所医院感染监控中心,北京市100071
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β-1,3-葡聚糖是真菌细胞壁的主要成份,其合成酶的调节亚基Rho1对维持细胞壁完整性及真菌形态具有重要意义,而Rho1对烟曲霉形态及生理功能的影响及可能调控机制仍不清楚。通过构建打靶载体,利用根癌农杆菌介导的烟曲霉转化技术,我们成功获得了烟曲霉AF293的rho1基因敲除株(⊿rho1)及其回补株(rho1c)。初步研究发现:在烟曲霉基础培养基上,⊿rho1在37℃几乎不能生长;在30℃时△rho1可以生长,但生长速率低于野生株;而在25℃时⊿rho1的生长速率远高于野生株;回补株rho1c则与野生株基本一致。在沙氏培养基上也得到了相同的结果,这在世界范围内属首次发现;在察氏培养基上,△rho1的菌落边缘比野生株更为光滑,菌落中部隆起,菌丝可向上生长,菌落颜色与野生株相似;在添加荧光白的YGA培养基上,⊿rho1菌丝顶端可见破裂现象;而在添加刚果红的YGA培养基上,△rho1在菌落形态及生长速率等方面与野生株相比无明显差异。体外实验表明,△rho1侵染肺Ⅱ型上皮细胞的效率显著低于野生株,而回补株与野生株无差别。综上所述,烟曲霉rho1基因功能的缺失显著诱发烟曲霉形态及温度适应性,并显著抑制其对宿主上皮细胞的侵染,而其具体调控机制有待进一步深入研究。
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