卢氏鸡IFN-γ成熟蛋白基因的克隆与原核表达产物处理方法研究

来源 :2013年中国畜牧兽医学会兽医病理学分会暨中国病理生理学会动物病理生理学专业委员会学术研讨会 | 被引量 : 0次 | 上传用户:liuyu890501
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干扰素具有抗病毒、抗肿瘤及免疫调节等功能,可作为一种天然治疗剂和佐剂,鉴于目前尚未见到关于地方优良品种卢氏鸡IFN-γ的相关研究报道,本试验对卢氏鸡IFN-γ成熟基因序列进行了克隆、基因遗传变异分析及原核表达,并通过超声波破碎法、超声波和溶菌酶联合使用法、高压匀浆法、高压匀浆和溶菌酶联合使用法等四种方法对卢氏鸡IFN-γ重组蛋白进行了提取,进而对不同方法的提取效果进行了研究.结果表明:鸡IFN-γ成熟蛋白基因片段克隆及在大肠杆菌BL21表达成功,且卢氏鸡IFN-γ与白莱航鸡、印度原鸡、原鸡同源性最高,与野鸽的同源性最低.四种提取方法获得的鸡IFN-γ重组蛋白热原质及内毒素含量均符合规定,且鸡IFN-γ通过口服或注射途径对法氏囊、脾脏的生长无影响,对胸腺的生长有促进作用,对家禽的生长无影响;鸡IFN-γ以包涵体的形式可以提高NDVⅥ系弱毒苗的免疫水平.这为卢氏鸡IFN-γ今后的开发应用奠定理论基础.
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