基于液滴微流控的多肽筛选新方法及其应用

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特异性多肽在生物传感器的构建以及肿瘤的早期诊断和靶向治疗中都扮演着重要的角色。传统的噬菌体展示技术可以用于特异性多肽的筛选,但是存在周期长,成本高,劳动量大和通量小等缺点。为解决这些问题,我们发展了基于液滴微流控的多肽筛选方法。该方法将液滴微流控技术和噬菌体展示技术结合,快速获得大量的均一的单克隆噬菌体液滴作为噬菌体扩增的反应腔体,将文库与靶标的结合转换成荧光信号,利用流式细胞仪或者荧光显微镜对阳性克隆和阴性克隆进行分选,收集荧光信号较强的阳性克隆进一步测序和分析。该方法缩短了筛选周期,降低了筛选成本,节省了大量的劳动力,提高了筛选的通量和效率,实现了特异性多肽的高通量和集成化快速筛选。获取的特异性多肽具有易合成、易修饰、活性高、成本低、分子量小、组织穿透性好和不容易引起免疫应答等优点,可以克服抗体制备难、批次差异大、易失活、成本高等问题。更重要的是,特异性多肽不仅可以作为识别元件与气压计、血糖仪或双色荧光等检测策略结合用于构建高灵敏、高选择性的便携式即时检测方法,而且可以作为靶向分子用于肿瘤的早期诊断和靶向治疗。
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