猪胚胎冷冻保存技术研究进展

来源 :中国畜牧兽医学会动物繁殖学分会第十四届学术研讨会 | 被引量 : 0次 | 上传用户:xuehua812
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猪胚胎冷冻保存技术的发展为家畜品种资源的保存及濒-临动物的保护提供了新的技术途径。本文比较系统和完善的概述了近年来猪胚胎冷冻保存方法和提高冷冻效率的若干方法,探讨了现存的问题和对技术改进的展望。
其他文献
尝试改进并建立一种较可靠的、适合小鼠胚胎质量参考鉴定的双重荧光染色(细胞计数)方法。与传统方法相比,本实验中抗羊脾细胞抗血清的最佳稀释度为1□5,作用时间为30 min。豚鼠补体最佳稀释度为1□5,两种分染染料H33342和PI的工作浓度均降低至5.3 μg/mL便可着色,染色时间延长至90 min,加大了染料工作液中柠檬酸钠的浓度,并在计数观察前增加压片这一步骤。染色过程中应注意避免血清物质对抗
本文研究了运输应激、重复激素处理和不同来源促卵泡素对诱导羔羊卵泡发育(简称“幼羔超排”)效果的影响,比较了幼羔超排卵母细胞与屠宰场成年羊离体卵巢卵母细胞体外受精及早期胚胎体外发育能力,并研究了在发育液中添加EDTA对幼羔卵母细胞体外受精及早期胚胎发育能力的影响,结果表明:运输应激不影响幼羔超排所获卵母细胞数量(P>0.05),但重复幼羔超排会显著降低所获卵母细胞数量(P<0.05)。加拿大和宁波产
本文从鲜精与冻精、激活方法以及气相条件三个方面,开展了影响山羊卵母细胞质内单精子注射(ICSI)效果的因素研究。结果为:(1)冻精受精率显著高于鲜精(52.21%VS26.44%)(p<0.05);(2)与离子霉素5min+6一DMAP 3h联合激活(试验一组)相比,离子霉素单独处理15min(试验二组)能相对简捷.有效地激活ICsI后的山羊卵母细胞(卵裂率82.69%VS78.40%;桑椹胚率4
为探讨重复超排对供体牛繁殖力的影响,本文从人工授精及胚胎移植两方面进行分析。结果表明,1,供体牛进行超强度重复超排5次平均可用胚数分别为7.26、7.79.6.25、7.26、7.08枚,相互之间差异不显著(p>0.05)。2、超排后恢复期(5-10天)组的妊娠率为50.0%低于恢复期为(30-40天)组(66.67%)和(60-80天)组(60.47%)的妊娠率,但差异不显著(p>0.05)。超
3个实验就猪精子提取物对猪卵母细胞的孤雌激活效果进行了研究。结果表明,采用猪精子提取物显微注射孤雌激活猪卵母细胞的最佳注射剂量为2-4pl;采用液氮反复冻融法和超声波破碎法提取的猪精子提取物对猪卵母细胞都有显著的孤雌激活效果,2种提取方法孤雌激活效果差异不显著。猪精子蛋白浓度在1.35mg/ml以上,注射剂量为2-4pl时均可有效激活猪卵母细胞。
本研究采用液氮反复冻融或超声波破碎法获取水牛精子提取物,然后部分精子提取物采用超滤技术对精子蛋白进行了浓缩处理;采用紫外光度吸收法测定精子提取物中的蛋白质浓度。按实验设计通过显微注射将2-4pL含不同蛋门浓度的水牛精子提取物注入体外成熟的猪卵母细胞胞质内,观察孤雌激活处理后卵母细胞原核形成、卵裂以及随后发育到桑椹胚/囊胚的情况,以综合评定水牛精子提取物对猪卵母细胞的孤雌激活效果。
本研究采用毛细玻璃管法对牛卵母细胞进行玻璃化冷冻保存,解冻后再进行体外受精(IVF)和早期胚胎的体外培养(IVC)。在此技术的基础上,分别对冷冻前平衡时间、解冻处理、卵丘细胞层数以及卵母细胞所处的减数分裂阶段等影响卵母细胞冷冻保存的因素进行研究,以期筛选出适合牛卵母细胞冷冻保存的方法。结果发现,处于MⅡ期卵母细胞在10%二甲基亚砜(DMSO)+10%乙二醇(EG)液(VS1)中平衡1-3min,然
卵母细胞胞浆内单精子注射(ICSI)技术作为辅助受精的一种手段,自从出现以来,就显示出广泛的应用前景。作为一种旁路受精方式,ICSI技术丰富了经典的受精理论,也为研究受精机制提供了一个有效的实验模型。影响ICSI的因素很多,本文综述了精子顶体与核周鞘、细胞骨架与中心粒、DTT处理和卵母细胞激活因子(SOAF)等精子因素对ICSI的影响。
本试验首先对昆明白小鼠附睾精液进行冷冻保存,旨在研制其最佳的配方与冷冻程序;之后采用冷冻解冻后的小鼠精子,分别与新鲜卵母细胞组、冷冻卵母细胞组、打孔的卵母细胞组进行体外受精,旨在提高其体外受精效率。结果表明,利用棉子糖与不同卵黄浓度(0%-60%)作为冷冻液,其中卵黄浓度为30%时,冷冻-解冻后的精子与新鲜卵母细胞受精,其卵裂率与囊胚发育率(76.22%,63.64%)最高。采用卵黄浓度为30%的
本研究的目的是检测电激活前胺环己酮(CHX)预处理对猪体外成熟卵母细胞孤雌激活及随后胚胎发育的影响。结果去卵丘卵母细胞最佳电激活参数为120v/mm,40us,1DC。卵母细胞在含CHX(10mg/mL)的NCSU-23中处理10min获得的囊胚率最高(25%),显著高于处理0、30.40min组(12.3%、17.1%、4.9%)。试验结果表明电激活前,用CHX预处理较短时间可提高体外成熟卵母细