【摘 要】
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目的 获得重组表达仓库螨过敏原Lep d 2,为仓库螨过敏原的特性研究及其单克隆抗体的制备、临床试验以及特异性免疫治疗提供实验材料.方法 对仓库螨过敏原Lep d 2基因序列中加入Strep Ⅱ标签、终止密码子及酶切位点,并进行密码子优化,合成后全基因片段与pET44a连接,导入大肠杆菌进行重组表达,并优化其表达条件,分别采用亲和层析方法与免疫印迹技术对重组蛋白进行纯化和鉴定.结果 成功构建了rL
【机 构】
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广州医科大学附属第二医院 510260
【出 处】
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中华医学会2014年全国变态反应学术会议
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目的 获得重组表达仓库螨过敏原Lep d 2,为仓库螨过敏原的特性研究及其单克隆抗体的制备、临床试验以及特异性免疫治疗提供实验材料.方法 对仓库螨过敏原Lep d 2基因序列中加入Strep Ⅱ标签、终止密码子及酶切位点,并进行密码子优化,合成后全基因片段与pET44a连接,导入大肠杆菌进行重组表达,并优化其表达条件,分别采用亲和层析方法与免疫印迹技术对重组蛋白进行纯化和鉴定.结果 成功构建了rLep d 2基因的表达载体,诱导表达后获得分子量约为15 KDa,纯化后的重组蛋白的鉴定结果为正确表达.
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