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甘蓝型油菜是我国重要的油料作物,品质优良的甘蓝型油菜对国民生活质量的提升具有至关重要的作用,而优良脂肪酸含量的菜籽油对人类心血管健康非常有利。高油酸菜籽油能够调节人体内脂质代谢,维持心脑血管功能的正常进行,促进人体内消化吸收,降低人体内胆固醇,甘油三酯等含量。高油酸菜油被认为是与橄榄油、葵花油相媲美的高级食用类植物油。本研究利用CRISPR/Cas9基因编辑系统对甘蓝型油菜DT,627R和ZY50材料中的控制油酸合成代谢途径的关键基因BnaA.FAD2.a(LG A5)进行编辑,共获得164株转化单株,编辑效率为75.6%。其中有82.2%的突变单株表现为杂合突变或者双等位基因突变。所得到的编辑类型主要为单碱基插入,其中插入碱基C所占比例为56.6%高于其它碱基。利用石油醚-乙醚法测定基因编辑材料种子中脂肪酸含量,DT材料BnaA.FAD2.a(LG A5)突变单株的油酸含量高达82.12%±1.01%,而未编辑的DT材料种子中油酸的含量为54.21%±1.79%,基因编辑后材料相对于未编辑的受体材料油酸含量增幅为51.5%。以627R受体材料转FAD2靶基因A5位点的杂合突变体单株油酸含量最高可达79.51%±2.65%,而未编辑的627R油酸含量为62.19%±3.39%,突变单株油酸含量增幅为27.85%。ZY50的BnaA.FAD2.a(LG A5)杂合突变体单株油酸含量最高可达76.61%±2.81%,而受体材料ZY50油酸含量为64.45%±3.19%,突变单株油酸含量增幅为18.87%,达到极显著水平。收获的转FAD2靶基因A5位点的突变体单株种子中油酸的含量变化范围为63.40%～83.13%,而对应的非编辑受体材料中油酸含量范围为53.89%～65.58%,实验结果证明,对甘蓝型油菜A5FAD2基因突变后,能够显著增加油菜种子中油酸的含量。