苹果树腐烂病(Apple valsa canker)是苹果生产上的三大重要病害之一,由黑腐皮壳菌Valsa mali var.mali引起,该病在我国各苹果产区发生普遍,可造成果树主干及整树死亡,甚至毁园。前期研究表明,腐烂病菌侵染致病过程中可产生的一系列的细胞壁降解酶:木聚糖酶、纤维素酶、β-葡萄糖苷酶、多聚半乳糖醛酸酶和果胶甲基半乳糖醛酸酶,是腐烂病菌重要致病因子之一。β-葡萄糖苷酶能够水解结合于末端非还原性β-D-葡萄糖苷键,在协助纤维素酶降解纤维素的过程中起关键作用。本研究通过RT-PCR与TA克隆技术获得了β-glucosidase基因的全长cDNA序列(GenBank登录号KY646110),命名为β-glucosidaseⅡ,利用实时荧光定量PCR技术分析了β-glucosidaseⅡ在腐烂病菌侵染致病过程中的表达模式。序列分析结果显示:该基因包含1 689bp的开放阅读框,编码562个氨基酸,蛋白相对分子质量62.7 ku。β-glucosidaseⅡ与梨树腐烂病菌(Valsa mali var.pyri)β-glucosidase(KUI56905.1)氨基酸序列相似性最高为88%,与向日葵茎溃疡病菌(Diaporthe helianthi)β-glucosidase(0CW40953.1)氨基酸序列相似性为71%。qPCR结果表明:腐烂病菌接种苹果枝条后,β-glucosidaseⅡ表达量先下降后升高,接种后48h,β-glucosidaseⅡ的表达量比12h降低了3倍,接种后120h基因表达量为48h的10倍。苹果树腐烂病菌β-glucosidase基因的成功克隆和表达分析,为从分子水平上探究β-葡萄糖苷酶在腐烂病菌致病过程中的作用奠定了基础。