论文部分内容阅读
目的：探讨糖皮质激素对关节软骨细胞衰老和自噬影响,并分析自噬在其中的作用及机制.方法：培养SD大鼠软骨细胞,阿利辛染色和collagen Ⅱ免疫组化进行鉴定.使用不同浓度的地塞米松作用于软骨细胞不同的时间后,LysoTracker Red和MDC染色观察自噬囊泡的生成,Western blot检测LC3、beclin-1、P62、p70S6K和4EBP1蛋白表达的变化.β-半乳糖苷酶染色分析糖皮质激素对软骨细胞衰老的影响,并使用自噬抑制剂来探讨自噬对地塞米松作用下软骨细胞衰老的作用.结果：地塞米松可以显著提高软骨细胞的自噬水平,尤其是在作用4d后,LC3-Ⅱ表达随着地塞米松浓度的增加而升高,而P62和beclin-1的表达也验证自噬水平的升高.LysoTrackerRed和MDC染色发现软骨细胞中自噬泡的生成随着地塞米松浓度的升高而增加.mTOR信号通路上的p70S6K和4EBP1的磷酸化均被地塞米松抑制.更重要的是,地塞米松可以引起软骨细胞的衰老,而使用3-MA抑制自噬后,细胞进一步衰老.结论：糖皮质激素激活软骨细胞中的自噬,并同时诱导软骨细胞的衰老,而自噬在这过程中对细胞的衰老可能具有代偿性的保护作用.同时糖皮质激素抑制mTOR信号通路,可能与自噬的激活相关.