番木瓜生长素响应因子基因CpARF2调控果实采后成熟的机制研究

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番木瓜(Carica papaya L.)属于呼吸跃变型果实,果实采后在常温下迅速转黄、软化并完成后熟,贮藏期较短,限制了番木瓜产业的发展。果实采后成熟是一个受到多种生理生化因素影响的复杂生物学过程,植物激素及植物激素信号途径在调控果实成熟中发挥重要的作用。本研究对番木瓜生长素响应因子基因CpARF2调控果实成熟的生理和分子机制进行了深入研究。克隆得到了CpARF2基因全长,基因表达分析表明果实采后成熟及外施乙烯诱导了CpARF2基因的表达,亚细胞定位分析显示CpARF2定位在细胞核中。利用番茄遗传转化体系证实异源超量表达CpARF2转基因番茄具有缩短果实从授粉到破色期天数、加快乙烯释放量高峰期的出现、并加速叶片衰老等作用。通过酵母双杂交、GST Pull-down、BiFC和LCI等技术,证明CpARF2不但能与自身形成二聚体,还能和1个重要乙烯信号途径蛋白实现体外体内互作。通过双荧光素酶报告系统,发现互作复合体能显著诱导CpACS1、CpACO1、CpXTH12和CpPE51等基因启动子的活性,从而调控番木瓜果实采后成熟的进程。本研究初步揭示CpARF2参与番木瓜果实采后成熟调控的分子机制。
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