mito-K(ATP)在运动训练抗心肌缺血中的作用机制研究

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目的:本研究旨在揭示运动训练对心肌细胞线粒体ATP敏感性钾通道(mito-K(ATP))表达的影响,并探索mito-K(ATP)在运动预适应心脏保护作用中的作用机制,为预适应理论研究提供实验支持,为防治IRI提供新思路。方法:首先选择32只健康SD大鼠(11周龄)随机分成高、中、低强度的耐力运动训练组和对照组,8周运动训练结束后在转录水平和翻译水平检测mito-K(ATP)亚基表达;第二阶段选择80健康雌性SD大鼠随机分为大强度组、中等强度、小强度组及对照组,运动训练时间8周;运动训练结束后制备缺血再灌注损伤模型时,各训练组又随机均分为模型组和5-HD抑制组,5-HD抑制组在结扎冠状动脉左前下支前15min从颈静脉给予5-HD(10mg/kg),对照组均分为模型组和假手术组。缺血再灌注模型采用在体结扎冠状动脉方法,缺血40分钟,再灌注50分钟。记录I/R过程中的心脏收缩功能和心电图,I/R结束后,进行心肌切片病理学分析,检测血液中心肌酶活性,检测心肌细胞中的ATP含量和能荷,SOD活性、MDA含量、NOS活性、NO含量、钙离子浓度、心肌细胞凋亡、Fas表达及Caspase-3活性。结果:1、高、中、低强度耐力运动训练均可引起Kir6.1、Kir6.2和SUR2的在转录水平和翻译水平的表达增加。2、高、中、低强度的耐力运动训练均可有效恢复I/R过程中心脏的收缩机能,减轻I/R过程中心肌的损伤程度,起到抗I/R的心脏保护作用。这种作用可被mito-K(ATP)的阻断剂5-HD部分取消。3、不同强度耐力运动训练增加了I/R大鼠心肌的ATP和能荷,这一作用可被5-HD部分取消。4、不同强度耐力运动训练可以减轻I/R心肌细胞的钙超载,这一作用可被5-HD部分取消。5、不同强度耐力运动训练增加了I/R大鼠心肌的SOD活性,减少了I/R过程中MDA的生成,有效抑制了I/R过程中的自由基损伤,而5-HD没取消运动引起的这些效应。6、不同强度耐力运动训练诱导了I/R心肌cNOS的表达,抑制了I/R心肌iNOS的表达,促进了NO对I/R心肌的保护作用。5-HD没取消运动引起的这些效应。7、不同强度的耐力运动训练可减少I/R心肌细胞的凋亡,这一作用可被5-HD部分取消。结论:8周不同强度的耐力运动训练都可引起mito-K(ATP)表达增加,提高其的心肌细胞中的活性,mito-K(ATP)可能是运动预适应心脏保护作用的重要要靶点。不同强度的耐力运动训练均可产生不同程度的心脏保护效应,运动预适应通过增加mito-K(ATP)的活性,减轻I/R心肌细胞的钙超载,减少I/R过程引起的细胞凋亡,改善I/R心肌的能量代谢,从而保护I/R心脏的收缩机能,减少I/R引起的损伤。运动训练使心肌组织的抗氧化能力提高、N0生成的调节能力加强,一方面直接产生心脏保护效应,另一方面在I/R过程中对mito-K(ATP)的活动进行调节而产生心脏保护效应。
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