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目的:筛选人退变髓核细胞差异性表达的miRNA,对显著性高表达的miRNA进行验证并预测其靶基因;探讨JNK信号转导通路在IVDD分子生物学机制中发挥作用的可能.
方法:获取腰椎退行性疾病患者手术髓核组织8份和腰椎骨折患者正常髓核组织3份.依次进行髓核细胞分离、培养、染色鉴定、提取标本总RNA;采用miRNA微阵列基因表达实验和分析技术筛选差异表达的miRNAs并采用real-time qPCR技术对其中高表达者进行验证;分析预测靶基因,应用统计学方法分析与差异基因或靶基因功能显著相关的生物信号通路.
结果:退变组中miR-513a-5p和miR-494呈显著性高表达,并与验证结果相吻合;综合三种软件MicroCosm v5、TargetScan5.1和MICRORNA.ORG预测靶基因分别为MKK4和JunD,此两种靶基因均参与JNK信号通路.
结论:首次通过生物芯片技术筛选出退变椎间盘中高表达的miR-513a-5p和miR-494,并且预测出对应的靶基因MKK4和JunD;推论JNK信号传导通路在IVDD的发病机制中发挥了重要作用.