【摘 要】
：
构建能高效表达L-ATC水解酶的重组菌。用PCR方法扩增假单胞菌zjwp-14中L-ATC水解酶基因片段，将该DNA片段插入T载体上测序得到522bp的DNA序列；将此序列插入表达载体pET-28a(+)上
【机 构】
：
浙江工业大学生物制药研究所,浙江 杭州 310032
论文部分内容阅读
构建能高效表达L-ATC水解酶的重组菌。用PCR方法扩增假单胞菌zjwp-14中L-ATC水解酶基因片段，将该DNA片段插入T载体上测序得到522bp的DNA序列；将此序列插入表达载体pET-28a(+)上,转入大肠杆菌BL21(DE3)进行表达,重组菌在0.5mmol/LIPTG诱导5h后,SDS-PAGE电泳检测重组蛋白分子量为20.3kD。所构建的表达菌株用于转化DL-ATC,以DTNB法检测转化率达83.65％。L-ATC水解酶在大肠杆菌中实现了高效表达,获得了具有生物转化活性的L-ATC水解酶重组蛋白。
其他文献
丙酮酸是生物中心代谢途径上的重要中间代谢产物,利用已构建的E.coli lpdA-突变菌株,考察了 E.coli lpdA-突变菌对不同糖源的发酵能力,包括蔗糖、葡萄糖、果糖、木糖及其混合
采用羧乙基海因为单一碳源培养基从土壤中筛选出一株L-羧乙基海因酶产量较高的菌种(编号为cw44),并对其进行16s Rdna 菌种鉴定,鉴定其为浅多色链霉菌(Streptomyces pluricolo
本研究针对耐有机溶剂蛋白酶产生菌产酶量普遍较低的现象，设计正交实验，通过响应面分析得出培养基中影响产酶的三个主要成分的二次回归模型，参数估计以及方差分析表明三个因
本文对11种中极性大孔树脂进行静态吸附筛选,最终得到NKA-9大孔树脂作为填料对进行绿原酸的吸附,洗脱工艺从金银花水提液中高效分离提取绿原酸,研究了单根吸附柱的吸附与
中温下,采用两种不同的方法制备nhAP/重组类人胶原蛋白壳聚糖复合材料,第一种方法是通过将水热合成、重结晶相结合制备的纳米羟基磷灰石浆料与类人胶原蛋白壳聚糖共混,制备复
随着哺乳动物细胞大规模培养技术的快速发展，单克隆抗体单批发酵产量已经达到或超过了公斤级水平，这就需要下游纯化过程的规模相应扩大，以适应不断提高的上游生产力。本文对
与郁达夫离婚后，王映霞不愿以“弃妇”的形象示人，她重到社会上工作，心里赌着一口气，离开郁达夫，她要活得更好。 每天，王映霞把自己打扮得清清爽爽，脸庞虽然不再细腻如绸，轻盈柔软，但仍面目清新，神采奕奕。她还是美的，丰姿绰约，风韵犹存，追求她的人仍然不少，而且还不是无名小辈。她没有嫁给单身的“绯闻男友”浙江教育厅长许绍棣，一方面她不愿落人口舌，另一方面，她也害怕婚姻。她无限感慨地说：“对于婚姻，对于
设计分步导入洗脱程序,对脐血造血干/祖细胞进行玻璃化低温保存。对照组采用10％DMSO，1℃/min降温速率对细胞进行慢冻保存。利用冷台对保护剂的玻璃化过程进行可视化研究。复苏
在阳光普照的北京国际设计周会议室中看见了张欣，精致的妆容，自信的微笑足够让人为之倾倒。然而，一副宽大的眼镜又为她平添了一抹俏皮的书生气。之前的我一直在想作为北京国际设计周的产品创意总监的她应该是一个气场十足的女强人，但是在见到张欣的那一刻她的亲和力将我的想象一击而碎。在采访中，张欣的一句言谈、一个举手投足都展现着一种与众不同的魅力。而最令人心动的地方，还是她对于设计的热情，工作的执着，以及简单直率
本刊讯,近日,全军首个传染病妇产中心在解放军302医院落户,该妇产中心将为乙肝准妈妈们提供独立优质产科服务。据了解,我国是乙肝病毒高发地区,每年大约有10%乙肝母亲会将病