阻断PI3K和PKC信号通路对SDF-1α介导根尖牙乳头干细胞迁移的影响

来源 :中华口腔医学会牙体牙髓病学专业委员会第五次全国牙体牙髓病学临床学术研讨会 | 被引量 : 0次 | 上传用户:gkhksmq
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  目的:通过阻断磷酸肌醇-3-激酶(phosphoinositide-3 kinase,PI3K)和蛋白激酶C(protein Kinase C,PKC)信号通路,了解根尖牙乳头干细胞(stem cells from apical papilla,SCAP)迁移的变化.方法:1.采用Transwell细胞跨膜迁移小室模型观察SCAP的迁移数量,共设4组:空白对照组和阳性对照组为体外分离培养3代SCAP,2个试验组的SCAP分别用PI3K抑制剂LY294002及PKC抑制剂GF109203X预处理1小时;迁移小室中空白组的下室仅加入细胞培养液,阳性对照组和2个试验组的培养液中均加入100ng/ml SDF-1α.24小时后对跨膜迁移的SCAP计数并做统计学分析.2.采用CCK-8法检测LY294002及GF109203X对SCAP增殖的影响,共设3组:对照组为体外分离培养3代SCAP,2个试验组的SCAP分别用LY294002及GF109203X预处理1小时.24h后对OD450值检测并做统计学分析.结果:(1)阳性对照组SCAP跨膜迁移数量为32.87±3.01个/孔,显著高于空白对照组(14.75±2.39个/孔),差异有统计学意义(P<0.001).LY294002试验组迁移细胞数量为4.29± 1.11个/孔,GF109203X试验组迁移细胞数量为5.12±0.48个/孔,显著低于空白对照组,差异有统计学意义(P<0.001),2个试验组迁移细胞数量间无统计学差异(P>0.05).(2)CCK-8试验显示LY294002试验组24小时OD450值为0.225±0.06/孔,GF109203X试验组24小时OD450值为0.231±0.07/孔,2个试验组与对照组(0.24±0.02/孔)间无统计学差异(P>0.05).结论:LY294002和GF 109203X阻断PKC和PI3K信号通路,使SDF-1α介导SCAP的迁移受到抑制;信号通路抑制剂LY294002和GF109203X对SCAP增殖无影响.
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