利用Cas9CRISPR系统实现大肠杆菌染色体上的高效点突变

来源 :中国生物工程学会2014年学术年会暨全国生物技术大会 | 被引量 : 0次 | 上传用户:q344494
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  CRISPR(Clustered regularly interspaced short palindromic repeats)/Cas (CRISPR associated)系统指的是一种广泛存在于细菌与古细菌中的,由RNA介导的、可遗传的获得性免疫系统,利用它作为一种新的基因组编辑方法已经在小鼠,斑马鱼,秀丽线虫等主要模式生物中获得广泛的应用。大肠杆菌是分子生物学最常使用的模式微生物,对其基因组的修饰一般采用传统的酶切连接或者同源重组的方法,步骤繁琐,并且因为效率低需要用到抗性筛选。本文采用具有体内同源重组特性的大肠杆菌菌株DY330,将表达Cas9蛋白的质粒转化其中,使其稳定表达。
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