【摘 要】
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目的：利用全转录组基因测序分析骨肉瘤外泌体中肺转移生物标记物的富集情况,为骨肉瘤转移的机理研究和早期筛查提供提供基础.方法：收集两对骨肉瘤细胞株MG63.2(可肺转移)、MG63(无法肺转移)和细胞株HOS-143B(可肺转移)、HOS(无法肺转移)两对骨肉瘤细胞株上清液以及一对骨肉瘤患者血清(有、无肺转移各一例).通过外泌体提取试剂盒分离、纯化外泌体,通过NTA,透射电镜、WesternBlot
【出 处】
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中华医学会第十八届骨科学术会议暨第十一届COA国际学术大会
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目的：利用全转录组基因测序分析骨肉瘤外泌体中肺转移生物标记物的富集情况,为骨肉瘤转移的机理研究和早期筛查提供提供基础.方法：收集两对骨肉瘤细胞株MG63.2(可肺转移)、MG63(无法肺转移)和细胞株HOS-143B(可肺转移)、HOS(无法肺转移)两对骨肉瘤细胞株上清液以及一对骨肉瘤患者血清(有、无肺转移各一例).通过外泌体提取试剂盒分离、纯化外泌体,通过NTA,透射电镜、WesternBlot对外泌体进行表征.将外泌体RNA利用Ribo-zero法进行信使RNA(mRNA)及非编码RNA(ncRNA)组建库,最后采用Hiseq2000测序平台进行全转录组测序,数据通过差异基因分析,GO功能注释以及基因网络分析,比较转移性骨肉瘤与非转移性骨肉瘤RNA组学差异.通过rt-PCR对于细胞上清及患者血清外泌体中RNA生物标记物进行验证,同时入组骨肉瘤患者23例,研究其血清外泌体生物标记物与肺转移及总体生存预后的相关性.
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