【摘 要】
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目的:缺氧诱导因子2α(hypoxia induced factor 2α,HIF-2α)是一种具有bHLH-PAS 结构的转录因子,能通过结合到靶基因启动子的作用位点,调控基因的表达,促进肿瘤血管生成
【机 构】
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湖北武汉430022,华中科技大学同济医学院附属协和医院小儿外科
【出 处】
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第三届全国小儿实验外科与临床新技术学术研讨会
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目的:缺氧诱导因子2α(hypoxia induced factor 2α,HIF-2α)是一种具有bHLH-PAS 结构的转录因子,能通过结合到靶基因启动子的作用位点,调控基因的表达,促进肿瘤血管生成和侵袭转移。本研究旨在探讨微小RNA(miRNA)对神经母细胞瘤中HIF-2α表达的调控作用及机制。方法:运用实时定量PCR、原位杂交方法检测HIF-2α在神经母细胞瘤组织和细胞株中的表达;采用基因芯片、数据库整合性分析,寻找调控HIF-2α表达的关键miRNA;运用3-UTR 报告基因检测、western blot、实时定量PCR 方法验证miRNA 对靶基因的调控作用;采用软琼脂集落形式实验、划痕迁移实验、Transwell 小室法、内皮细胞小管形成、裸鼠动物实验观测miRNA对神经母细胞瘤细胞体内外增殖、游走和侵袭、血管生成活性的调控作用。结果:HIF-2α在神经母细胞瘤组织和细胞中高表达,其表达水平与miRNA-145 呈显著负相关;miRNA-145 能靶向HIF-2α基因3-UTR,抑制其表达水平。过表达miRNA-145 能显著抑制神经母细胞瘤细胞的体内外生长、侵袭转移和血管生成活性,而回补HIF-2α表达水平能有效阻遏miRNA-145 对神经母细胞瘤恶性进展的调控作用。结论:神经母细胞瘤中HIF-2α高表达,而miRNA-145 能通过靶向HIF-2α 3-UTR,阻遏神经母细胞瘤的增殖、侵袭转移和血管生成,有望成为神经母细胞瘤治疗的新靶标。
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