海藻酸钠复合载体立体培养体系对软骨细胞表型稳定及特异性表达的影响

来源 :2010广东省医学会骨科年会暨岭南骨科学术大会 | 被引量 : 0次 | 上传用户:tiger_adan
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  目的 本研究制备了四海藻酸钠复合载体培养软骨细胞体系,探讨了此培养体系对长期培养的软骨细胞的表型稳定及软骨细胞特异性表达的影响.方法 建立了平面单层贴壁和多因素的海藻酸钠复合载体立体培养软骨细胞模型:1.建立平面贴壁与海藻酸钠复合载体培养软骨细胞的对照与实验组,接种同量的细胞,按时间点收集细胞上清液,用阿利新蓝法测定糖胺多糖含量;2.用荧光定量PCR检测不同时间点实验组与对照组软骨细胞Ⅱ型胶原、糖胺多糖的特异表达;3,冰冻切片及HE染色观察海藻酸钠复合载体的形态学改变;4.用激光共聚焦显微镜观察细胞骨架、PI染色的复合载体长期培养的软骨细胞的形态.结果 1.测定从实验当天直到23d的两组细胞上清液中的糖胺多糖含量结果示:复合载体组细胞上清液中的糖胺多糖含量明显高于平面贴壁组.2.荧光定量PCR测定结果示:复合载体中软骨细胞Ⅱ型胶原、糖胺多糖的特异表达均高于平面贴壁组.3.形态学观察显示软骨细胞在海藻酸钠复合载体中生长良好,并形成球状细胞团,而平面贴壁对照组细胞已逐步衰老及去分化.结论 海藻酸钠复合载体对长期培养的软骨细胞有利于软骨细胞维持表型稳定及功能的特异性表达.
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