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目的分离广西五步蛇（Agkistrodon acutus）蛇毒细胞毒素,并初步探讨其体外抗癌活性。方法Sephadex G50,Source 30Q 及phenyl sepharose HP 柱层析分离纯化抗癌组分I3-H3,并采用溴化二苯四偶氮盐（MTT）比色法检测其对体外培养的人癌细胞的细胞毒作用,探索量效关系。结果从广西五步蛇蛇毒中分离出一种电泳纯细胞毒素I3-H3,分子量为36KD。其对体外培养的人肺癌细胞株（A549）,人胃癌细胞株（BGC）和人鼻咽癌细胞株（KB）的抑制作用呈明显剂量依赖关系,作用24h 的IC50分别为27.75、26.90和64.46μg/ml。结论I3-H3对体外培养的人癌细胞有较强抑制和杀伤作用。