【摘 要】
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目的：建立重组幽门螺杆菌多靶点疫苗工程菌BIB的高密度发酵工艺.方法：以摇瓶发酵结果为基础,放大工艺至50L发酵罐中,对影响目的蛋白收率的因素如发酵培养基、工作种子接种量、诱导剂浓度、诱导起始时间、诱导持续时间、诱导剂添加方式及补料策略等进行优化验证.结果：采用改良TB培养基、37℃活化BIB工作种子8h后,按体积比(v/v) 5％接种、终浓度为5 mmol/L的乳糖诱导表达11h,在工程菌生长期
【机 构】
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四川大学华西基础医学与法医学院 四川 成都 610041;四川万可泰生物技术有限责任公司 四川 成都 610000
【出 处】
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第四届中国临床微生物学大会暨微生物学与免疫学论坛
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目的：建立重组幽门螺杆菌多靶点疫苗工程菌BIB的高密度发酵工艺.方法：以摇瓶发酵结果为基础,放大工艺至50L发酵罐中,对影响目的蛋白收率的因素如发酵培养基、工作种子接种量、诱导剂浓度、诱导起始时间、诱导持续时间、诱导剂添加方式及补料策略等进行优化验证.结果：采用改良TB培养基、37℃活化BIB工作种子8h后,按体积比(v/v) 5％接种、终浓度为5 mmol/L的乳糖诱导表达11h,在工程菌生长期以80 ml/h的葡萄糖、诱导期以40 ml/h的甘油为流加碳源,滴加氨水控制pH在7.0左右,调整转速以控制溶解氧在30％以上,最终菌体产量为70 g/L,蛋白表达量为32％左右.结论：重组工程菌经高密度发酵后,显著提高了目的蛋白rBIB的表达和收率.
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