【目的】:针对银环毒素中主要致死性毒素成分,设计制备含有多种致死性银环毒素主要抗原表位的抗原,并利用通过该基因工程抗原免疫动物获得只针对蛇毒中致死性毒素成分的抗体,探索建立一种制备高效、广谱、专一的抗蛇毒抗体制备方法。【方法】:采用Jameson-Wolf方法并和Clustal X软件相结合的生物信息学方法分析α、p和K银环毒素的抗原位点,人工合成含有多个银环毒素抗原位点的序列;将该序列连接到原核表达载体pET-28a(+)后,转化至BL21大肠杆菌中,挑选的阳性克隆,用:IPTG诱导表达,通过亲和柱层析得到表达的目的蛋白,目的蛋白免疫连续免疫小鼠5次后采血,ELISA和毒素攻毒保护实验检测免疫后的抗体效价。【结果】:通过生物信息学分析得到10个银环毒素抗原表位,构建的原核表达载体在BL21中的表达的目的蛋白分子量约为20Kda,纯化后的目的蛋白纯度为95%。ELISA抗体效价为10-3阳性,在全数致死剂量的银环蛇毒攻毒下,能够保护66.7%小鼠存活。【结论】:用构建的含有三种银环毒素多个关键抗原表位序列的原核表达载体转化BL21大肠杆菌后,诱导表达的蛋白免疫小鼠能使小鼠产生较高效价中和抗体;本研究通过生物信息学方法分析预测的含有蛇毒主要毒性蛋白关键抗原表位的人工合成序列,利用原核表达系统获得的新型免疫源,为新型广谱、多价,高效,专一抗蛇毒血清的研究探索了一种新的方法。