【摘 要】
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番茄褐色皱纹果病毒（tomato brown rugose fruit virus,ToBRFV）属于植物杆状病毒科（Virgaviridae）烟草花叶病毒属（Tobamoviruses）,可侵染40多种植物,对番茄的危害尤为严重,影响番茄果实着色,严重降低果实的产量和品质。该病毒于2014年在以色列被首次发现,随后在全世界大范围流行,被多个国家和地区列为入境检疫性植物病毒。本研究选取ToBRFV
【机 构】
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中国植物病理学会2023年学术年会论文集
【出 处】
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中国植物病理学会2023年学术年会论文集
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番茄褐色皱纹果病毒（tomato brown rugose fruit virus,ToBRFV）属于植物杆状病毒科（Virgaviridae）烟草花叶病毒属（Tobamoviruses）,可侵染40多种植物,对番茄的危害尤为严重,影响番茄果实着色,严重降低果实的产量和品质。该病毒于2014年在以色列被首次发现,随后在全世界大范围流行,被多个国家和地区列为入境检疫性植物病毒。本研究选取ToBRFV外壳蛋白编码基因作为靶标序列,分别设计用于重组酶聚合酶扩增技术（recombinase polymerase amplification,RPA）的特异性引物和用于簇状规则间隔短链重复序列（clustered regularly interspaced short palindromic repeats,CRISPR）及CRISPR相关蛋白12a （CRISPR-associated 12a,Cas12a）系统的crRNA。经过反应体系优化及特异性验证,建立了ToBRFV的快速可视化检测体系,在RPA和CRISPR/Cas12a分别反应15 min后,即可使用便携式蓝光照射仪器观察阳性信号。该方法可有效区分ToBRFV和同属辣椒轻斑驳病毒、番茄花叶病毒、番茄斑驳花叶病毒以及其他常见番茄病毒,检测灵敏度达到3.46fg/μL,是普通RT-PCR检测的10 000倍,可实现ToBRFV快速灵敏的可视化检测。
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