猪场饮用水肠球菌的分离鉴定及其耐药性分析

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肠球菌(Enterococcus)是重要的环境指示菌,同时又是潜在的动物条件性致病菌。动物饮用水中的肠球菌耐药的相关研究目前未见报道,本实验采集猪场不同来源的饮用水、分离鉴定肠球菌,测定肠球菌的耐药现状。目的:了解不同地区、不同猪场来源的饮用水肠球菌对土霉素(OXY)、氨苄西林(AMP)、环丙沙星(CIP)、万古霉素(VAN)、氯霉素(CHL)、红霉素(ERY)的耐药情况,了解猪场水源进水口、蓄水池、怀孕舍饮水、分娩舍饮水、保育舍饮水及肥育舍饮水等饮用水肠球菌属细菌抗生素耐药表型及耐药谱,试图探讨猪场水源与饮水器出水在肠球菌耐药方面的差异并分析原因,为猪场饮用水细菌耐药提供基础数据。方法:采集南平地区9个猪场和福州地区11个猪场不同来源的饮用水。富集培养水样中的微生物,进行肠球菌的分离培养并通过生化、PCR方法鉴定肠球菌菌株,保存。采用微量肉汤稀释法对分离菌进行药物敏感性实验,测定肠球菌对抗生素的最小抑菌浓度(MIC)。获得猪场饮用水肠球菌各个采样点的耐药表型,分析耐药谱,了解猪场饮用水肠球菌的耐药情况及分布特点。结果:(1)南平地区9个猪场42株饮用水分离菌对抗生素的耐药率由高到低分别为:土霉素>红霉素>氯霉素>环丙沙星>氨苄西林>万古霉素。其中对土霉素、红霉素的耐药率最高,分别为:80.95%、66.67%;对氯霉素、环丙沙星、氨苄西林的耐药率稍低,分别为35.71%、19.05%、16.67%;分离出6株VRE,耐药率为14.29%。(2)福州地区11个猪场46株饮用水分离菌对抗生素的耐药率由高到低分别为:红霉素>土霉素>氯霉素>环丙沙星>氨苄西林>万古霉素。对前四种药的耐药率都超过50%,分别为:84.78%、76.09%、67.39%、50%,对氨苄西林的耐药率较低,为19.57%,分离出2株VRE,耐药率为4.35%。(3)南平地区9个猪场源头饮用水与饮水器饮用水肠球菌耐药比较:水池进水口及蓄水池分离菌总体表现为对土霉素和红霉素耐药,耐药率较饮水器饮用水分离菌略低,对土霉素的耐药率分别为77.78%、87.5%,对红霉素的耐药率分别为55.56%、50%;对氯霉素、环丙沙星、氨苄西林的耐药显著低于饮水器分离菌,水池进水口的耐药率分别为22.22%、11.11%、11.11%,蓄水池的耐药率分别为25%、0%、12.5%;保育舍饮水器分离菌对所有药物都有更高的耐药率,其次为母猪舍饮水器、育肥舍饮水器。共分离出6株VRE,其中4株来自猪场源头饮用水,2株来自饮水器饮用水。(4)福州地区11个猪场源头饮用水与饮水器饮用水肠球菌耐药比较:蓄水池分离菌总体表现为对土霉素、红霉素、氯霉素耐药,耐药率较饮水器饮用水分离菌略低,为72.73%、72.73%、63.64%,对环丙沙星、氨苄西林的耐药显著低于饮水器分离菌,分别为27.27%、9.09%。保育舍饮水器分离菌对所有药物都有更高的耐药率,其次为育肥舍、哺乳舍、怀孕舍饮水器。共分离出2株VRE,分别来自蓄水池和育肥舍饮水器。(5)猪场饮用水耐药谱分析南平地区9个猪场饮用水肠球菌一共有11种耐药谱,福州地区11个猪场一共有13种耐药谱,南平地区猪场发现有11株分离菌对4~5种抗生素耐药,其中有5株来自保育舍饮水器。福州地区猪场有19株分离菌对4~5种的抗生素耐药,有5株来自保育舍饮水器,且其中有4株表现对5种抗生素耐药。水池进水口及蓄水池分离菌的多重耐药率均低于饮水器分离菌,保育舍饮水器多重耐药率最高结论:(1)猪场源头饮用水与饮水器饮用水分离菌对土霉素和红霉素普遍耐药。源头饮用水分离菌对氯霉素、环丙沙星、氨苄西林的耐药率普遍低于饮水器饮用水,保育舍饮水器分离菌的抗生素耐药率普遍高于其它采水点。(2)两个地区的猪场饮用水分离菌的抗生素耐药谱较多,多重耐药现象也较严重。南平地区9个猪场的保育舍饮水器分离菌的多重耐药率最高,福州地区11个猪场的保育舍、育肥舍饮水器分离菌的多重耐药率最高。
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