【摘 要】
：
引言 为了探究PB2蛋白的第627位氨基酸对于人源的H3N2猪流感病毒的复制能力和致病力的影响，本实验构建了猪流感病毒A/swine/Heilongjiang/1/2005 (H3N2)的反向遗传操作技术平台，以之为基础，通过细胞和小鼠上的实验来探究该病毒的PB2-627位由K突变为E后对其复制能力和致病力的影响。材料与方法 猪流感病毒A/swine/Heilongjiang/1/2005 (H3
【机 构】
：
中国农业科学院上海兽医研究所,上海,200241
【出 处】
：
中国畜牧兽医学会动物传染病学分会第十六次学术研讨会
论文部分内容阅读
引言 为了探究PB2蛋白的第627位氨基酸对于人源的H3N2猪流感病毒的复制能力和致病力的影响，本实验构建了猪流感病毒A/swine/Heilongjiang/1/2005 (H3N2)的反向遗传操作技术平台，以之为基础，通过细胞和小鼠上的实验来探究该病毒的PB2-627位由K突变为E后对其复制能力和致病力的影响。材料与方法 猪流感病毒A/swine/Heilongjiang/1/2005 (H3N2)保存于本实验室。通过RT-PCR进行八基因片段的扩增。然后将其连到PBD双向表达载体上，转化，提质粒，获得八个阳性重组质粒。将八质粒共转染293-T细胞，得到少数病毒粒子后，接到MDCK细胞上，使病毒大量扩增。
其他文献
引言 禽流感、新城疫是严重危害我国养禽业的重要疫病,目前对这两种疾病的防制主要依赖疫苗。本研究在分子流行病学调查及高效反向遗传操作平台基础上,拯救表达H9亚型禽流感病毒HA蛋白的重组新城疫病毒,以期获得与目前优势流行株匹配的基因Ⅶ型疫苗候选株。材料与方法 BHK-21细胞由本实验室保存；SPF鸡胚购自北京梅里亚维通实验动物技术有限公司。重组病毒感染性克隆的构建：常规方法提取H9亚型禽流感病毒RNA
前言 鸽新城疫是由1型禽副粘病毒引起的一种高度接触性、败血性传染病。该病发病急、传播快、死亡率高，给养鸽业造成了极大的危害。本实验室从北京地区发病的商品肉鸽中分离到1株新城疫病毒并对其全基因组序列进行分析，实验感染雏鸽表现出极高的致病性，并通过口咽和泄殖腔持续排毒，引发同居感染。材料和方法 病毒分离采集发病鸽肝脏和脑组织，研磨制成20％悬液并用220nm孔径滤膜过滤除菌，接种3枚9日龄SPF鸡胚，
新城疫是由新城疫病毒引起的以感染禽类为主的一种急性、热性、败血性和高度接触性传染病，被OIE列为必报动物疫病，也是我国中长期规划五大优先防治的动物疫病之一.本研究以不同宿主NDV的分子流行病学为切入点，结合生物信息学手段，统计了NCBI 1475条新城疫病毒F基因序列(GenBank截止2015.5.1)，整理并完善其宿主来源、分离年代和地域等背景信息；并基于F基因47-420nt高变区(374b
引言/目的 新城疫病毒(Newcastle disease virus,NDV)强毒感染是危害全球养禽业最严重的急性、烈性病毒病之一,因此该病被OIE列为必须上报的疾病,也是我国农业部规定的一类疫病和《国家中长期动物疫病防治规划(2012-2020)》中优先防治和重点防治的5种一类动物疫病之一.因此调查地区性新城疫的流行毒株的基因型,可为新城疫的防控和研究提供科学依据.材料和方法 2015年4-6
引言/目的 新城疫(Newcastle disease,ND)是一种由新城疫病毒(Newcastle disease virus,NDV)强毒株引起的可导致多种禽类发病死亡的烈性传染病,被OIE列为必须上报的疾病之一。虽然NDV目前只有一个血清型,但根据基因组结构和遗传距离可将所有的毒株划分为ClassⅠ和ClassⅡ两大分支。目前所流行的强毒株和现阶段常用的弱毒疫苗毒株均属于ClassⅡ分支,C
引言 新城疫(Newcastle disease,ND)是危害世界养禽业的重要传染病之一,当前在世界范围内NDV的流行以基因Ⅶ型为主,而国内外广泛使用的弱毒疫苗株均为基因Ⅱ型,由于基因型与抗原性的不匹配,当前广泛应用的弱毒疫苗株不能完全阻止病毒感染,并且受到强毒流行株攻击后排毒现象严重。反向遗传操作技术的发展,尤其是理想的病毒拯救系统,为研发与流行毒株相一致的基因Ⅶ型NDV弱毒疫苗候选株及候选疫苗
研究目的 利用平衡致死系统构建表达鸡新城疫病毒(Newcastle disease virus,NDV)血凝素-神经氨酸酶(HN)的减毒鸡白痢沙门菌(Salmonella enteria serovar Pullorum,S.Pullorum)活载体疫苗株,并进一步研究该菌株的生物学及免疫学特性,为筛选合适的重组减毒沙门菌作为疫苗候选株提供一定依据.材料方法 本试验将PCR扩增出的HN基因片段克隆
目的 探讨戊型肝炎病毒(HEV)在吉林地区部分人群中的感染情况及系统进化关系.方法 用抗-HEV抗体酶联免疫试剂盒检测人血清中的抗体；对部分血清和粪便标本用RT-PCR检测HEV RNA,对PCR阳性产物进行克隆测序,然后对序列进行分析.结果 吉林地区各年龄组共7514份人血清中有1621份为抗-HEV抗体阳性,阳性率为21.57％；其中男性阳性率为30.87％,女性阳性率为12.01％.20岁以
引言/目的：2009年4月，新型猪源H1N1亚型流感病毒(即甲型H1N1流感病毒)出现在墨西哥等地，随后在全球迅速传播，引发本世纪第一次流感大流行。作为一种人畜共患的流感病毒，其有可能通过基因突变来增强对哺乳动物的致病性，对公共卫生安全构成潜在危害。小鼠作为一种哺乳动物模型，被广泛应用于流感病毒致病机理的研究。
引言 猪流感(Swine influenza,SI)是引起猪急性,高度传染性的一类呼吸系统性疾病,不仅给养猪业带来巨大损失,而且危害人类健康.从我国商品猪体内分离得到H1N1亚型SIV主要是古典猪源H1N1亚型和欧亚禽源H1N1亚型SIV.本研究利用反向遗传操作技术,以高产且传代致弱A/Puerto/8/34 (H1N1)(简称PR8)的6个内部基因片段(PB2、PB1、PA、NP、M和NS)为骨