论文部分内容阅读
利用BHK-21细胞常规增殖乙脑病毒，设未接种JEV病毒的BHK-21细胞为对照抗原，同时经浓缩及超速离心后，将所得样品作为免疫抗原常规途径免疫BALB/c小鼠。取小鼠脾细胞与SP2/0骨髓瘤细胞进行融合，最终选取试剂盒检测OD450值最高者经有限稀释法进行4次亚克隆。结果显示：常规免疫组的融合率约34％，阳性率近1％，共获得3株能稳定分泌抗JEV病毒的杂交瘤细胞系，分别命名为JEV.1、JEV.2、JEV.3。经亚型鉴定试剂盒检测JEV1、JEV.2、JEV.3抗体亚类均为：IgG1，轻链为κ型;间接ELISA方法检测到3株杂交瘤细胞均具有良好的传代及热稳定性，细胞培养上清效价均为103，免疫小鼠所制备的腹水效价为105，血清中的抗体效价为104：相加试验证实此3株细胞系针对的抗原决定簇存在一定差异;特异性试验及间接免疫荧光试验证实三株单抗均具有良好的特异性;各株单抗的相对亲和力分别为：JEV.1 5mol/L、JEV.24mol/L、JEV.35mol/L。